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核酸抗原试题及答案

一、单选题（每题2分，共20分）

1.核酸抗原检测的主要原理是（）（2分）

A.酶联免疫吸附反应B.聚合酶链式反应C.电化学发光反应D.荧光免疫分析

【答案】B

【解析】核酸抗原检测主要基于聚合酶链式反应技术，通过扩增目标核酸片段进行检测。

2.在核酸抗原检测中，Tm值通常表示（）（2分）

A.熔解温度B.抗体结合能力C.荧光强度D.特异性指数

【答案】A

【解析】Tm值代表核酸双链解旋的熔解温度，是衡量核酸稳定性的指标。

3.核酸抗原检测中常用的引物长度一般约为（）（2分）

A.15-20bpB.25-35bpC.50-100bpD.200-500bp

【答案】B

【解析】PCR检测中引物长度通常为25-35bp，以确保特异性结合。

4.核酸抗原检测中，dNTPs的作用是（）（2分）

A.合成引物B.提供能量C.扩增模板D.标记荧光

【答案】C

【解析】dNTPs是PCR反应的原料，用于合成新的核酸链。

5.核酸抗原检测的灵敏度通常以（）表示（2分）

A.拷贝数/毫升B.灰度值C.阳性率D.阴性率

【答案】A

【解析】灵敏度常用目标核酸的拷贝数浓度表示，单位通常是拷贝/毫升。

6.核酸抗原检测的特异性主要取决于（）（2分）

A.样本量B.引物设计C.试剂纯度D.仪器精度

【答案】B

【解析】特异性与引物设计密切相关，特异性引物能减少非特异性扩增。

7.核酸抗原检测中，核酸酶的作用是（）（2分）

A.降解模板核酸B.延伸DNA链C.合成引物D.切割引物

【答案】A

【解析】核酸酶用于降解模板核酸，防止非特异性扩增。

8.核酸抗原检测的洗脱步骤主要目的是（）（2分）

A.去除游离荧光基团B.固定扩增产物C.增加信号强度D.提高特异性

【答案】A

【解析】洗脱步骤去除未结合的游离荧光基团，提高检测信号质量。

9.核酸抗原检测中，退火温度通常设定在（）（2分）

A.Tm+5℃B.Tm-5℃C.Tm+10℃D.Tm-10℃

【答案】D

【解析】退火温度通常比Tm低10℃，以确保引物特异性结合。

10.核酸抗原检测中，凝胶电泳主要用于（）（2分）

A.定量分析B.纯化产物C.检测条带D.扩增模板

【答案】C

【解析】凝胶电泳用于检测PCR产物，通过条带形态评估反应结果。

二、多选题（每题4分，共20分）

1.核酸抗原检测过程中可能需要的试剂包括（）（4分）

A.引物B.dNTPsC.Taq酶D.缓冲液E.核酸酶

【答案】A、B、C、D

【解析】PCR反应需要引物、dNTPs、Taq酶和缓冲液，核酸酶通常用于抑制非特异性扩增。

2.影响核酸抗原检测准确性的因素有（）（4分）

A.样本处理B.试剂质量C.反应条件D.仪器精度E.操作者水平

【答案】A、B、C、D、E

【解析】准确性受样本处理、试剂、反应条件、仪器和操作者多方面因素影响。

3.核酸抗原检测中常用的荧光标记物包括（）（4分）

A.FAMB.TAMRACCy5D.EDTAE.DNAse

【答案】A、B、C

【解析】FAM、TAMRA和Cy5是常用的荧光标记物，EDTA和DNAse则与荧光标记无关。

4.核酸抗原检测的标准化操作包括（）（4分）

A.样本前处理B.反应体系配制C.梯度扩增D.结果判读E.数据记录

【答案】A、B、C、D、E

【解析】标准化操作涵盖样本处理到数据记录的全过程。

5.核酸抗原检测中可能出现的假阳性原因有（）（4分）

A.交叉污染B.试剂失效C.操作不当D.样本干扰E.仪器故障

【答案】A、B、C、D、E

【解析】假阳性可能由多方面因素导致，包括污染、试剂、操作、样本和仪器问题。

三、填空题（每题4分，共20分）

1.核酸抗原检测通常采用______技术，其基本反应过程包括______、______和______三个阶段。

【答案】PCR；变性；退火；延伸

【解析】PCR检测通过变性、退火和延伸三个阶段特异性扩增目标核酸。

2.核酸抗原检测的灵敏度主要取决于______和______两个因素。

【答案】引物设计；退火温度

【解析】灵敏度与引物特异性和退火温度密切相关。

3.核酸抗原检测中，Tm值是指______时的温度。

【答案】核酸双链解旋

【解析】Tm值代表核酸双链解旋的熔解温度。

4.核酸抗原检测的洗脱步骤通常使用______进行清洗。

【答案】洗涤缓冲液

【解析】洗脱步骤使用专用洗涤缓冲液去除游离荧光基团。

四、判断题（每题2分，共10分）

1.核酸抗原检测的特异性与引物设计无关。（）（2分）

【答案】（×）

【解析】特异性高度依赖于引物设计，特异性引物能减少非特异性扩增。

2.核酸抗原检测中，Tm值越高表示核酸越不稳定。（）（2分）

【答案】（×）

【解析】Tm值越高表示核酸越稳定，解旋所需温度越高。

3.核酸抗原检测通常需要