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病理科肺癌组织活检标本处理流程

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目录

01

标本接收与准备

02

固定与处理阶段

03

脱水与浸蜡过程

04

包埋与切片制作

05

染色与显微镜分析

06

报告与质量控制

01

标本接收与准备

标本接收登记流程

双人核对制度

接收标本时需由两名工作人员共同核对患者信息、标本类型及数量，确保与申请单一致，避免混淆或遗漏。

初步检查与记录标准

标本完整性评估

检查组织大小、形状、颜色及质地，记录是否有坏死、出血或钙化区域，初步判断是否符合诊断要求。

固定液合规性检查

临床信息补充

确认标本是否完全浸没于10%中性缓冲福尔马林液中，固定液体积需为标本体积的5-10倍，避免固定不足或过度。

核对申请单是否包含吸烟史、家族肿瘤史及影像学结果，缺失时需联系临床补充，确保病理诊断的全面性。

1

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分级标签系统

若同一患者送检多个部位标本，需分装于独立容器并标注具体解剖位置（如左上叶、右下叶），防止交叉污染。

多部位标本分装

高危标本特殊标记

对疑似结核或传染性标本，需加盖生物危害标识并单独存放，严格遵循生物安全三级防护标准处理。

根据标本来源（如支气管镜活检、穿刺活检或手术切除）粘贴不同颜色标签，区分优先级和处理流程。

标识与分类规范

02

固定与处理阶段

使用10%中性缓冲福尔马林溶液（甲醛浓度3.7%-4.0%），确保pH值维持在7.2-7.4，避免组织酸碱性损伤。固定液体积需为标本体积的10-15倍，确保完全浸没。

福尔马林固定操作

固定液配制与浓度标准

活检标本需在离体后30分钟内放入福尔马林，避免自溶。较大组织需切开至厚度≤5mm，保证固定液渗透均匀，尤其注意肿瘤边缘与正常组织交界处的处理。

标本预处理规范

使用密闭性良好的塑料或玻璃容器，避免甲醛挥发导致浓度下降。容器内壁需标注患者信息及标本编号，防止混淆。

固定容器选择与密封要求

固定时间控制要点

最小固定时长要求

常规肺癌活检标本需固定6-12小时，确保组织充分硬化。微小标本（如穿刺活检）可缩短至4-6小时，但需通过病理医师评估确认固定效果。

超时固定的风险控制

固定超过72小时可能导致组织过度硬化，影响后续切片质量及抗原性。需定期检查固定液状态，及时更换浑浊或变色的固定液。

特殊成分组织的调整

含黏液或坏死成分较多的标本需延长固定至24小时，并配合二次修整确保深层组织固定完全。

特殊标本处理要求

钙化或骨化标本的脱钙流程

对含钙化灶的肺癌标本，需在固定后使用10%甲酸或EDTA溶液脱钙，每日监测脱钙进度，避免过度脱钙导致组织松散。

冰冻切片后剩余组织的处理

若活检标本需先行冰冻切片诊断，剩余组织应立即转入福尔马林固定，并延长固定时间至24小时以补偿前期冷冻造成的结构变化。

感染性标本的生物安全防护

疑似结核或真菌感染的标本需在生物安全柜中操作，固定液加入5%苯酚以灭活病原体，容器外贴警示标签并单独存放。

03

脱水与浸蜡过程

脱水步骤执行规范

梯度酒精脱水程序

组织标本需依次经过不同浓度酒精（如70%、80%、95%、100%）梯度脱水，每道程序需严格控制时间，确保组织内水分被彻底置换，避免后续处理中出现收缩或变形。

脱水试剂定期更换

酒精脱水剂需根据使用频率定期更换并记录，避免因试剂浓度下降导致脱水不彻底，影响后续透明与浸蜡效果。

温度与时间监控

脱水机运行期间需维持恒温环境（通常为室温），并依据组织类型调整脱水时长，确保不同厚度标本均达到理想脱水状态。

透明处理技术标准

二甲苯透明剂选择

采用高纯度二甲苯作为透明剂，分两至三次浸泡处理，每次时间需精确控制，以彻底置换组织内酒精并增强石蜡渗透性。

透明终点判断标准

透明操作需在通风橱内进行，实验人员需佩戴防毒面具及耐溶剂手套，避免吸入挥发性有害物质或皮肤接触。

通过观察组织透明度变化及试剂浑浊度评估透明效果，若出现组织发白或试剂混浊需立即终止并更换新试剂。

安全防护措施

选用熔点为56-58℃的高纯度石蜡，预先过滤去除杂质，确保浸蜡过程中无气泡或结晶析出，保障包埋后切片完整性。

石蜡熔点与纯度要求

浸蜡槽温度需稳定高于石蜡熔点2-3℃，组织标本分两阶段浸蜡（每次1-2小时），确保石蜡充分渗透至组织间隙。

浸蜡温度与时长控制

浸蜡完成后需将标本置于冷台缓慢冷却，避免快速降温导致石蜡龟裂或组织与蜡块分离，影响后续切片质量。

浸蜡后冷却规范

石蜡浸渍质量控制

04

包埋与切片制作

组织包埋操作方法

组织脱水与透明化处理

采用梯度酒精和二甲苯对标本进行充分脱水与透明化，确保组织内无残留水分或杂质，为后续浸蜡创造条件。

石蜡浸渍与包埋盒选择

将组织置于熔融石蜡中浸渍，使其完全渗透；根据组织大小选择合适包埋盒，避免挤压变形或边缘溢出。

包埋方向校准

确保组织切面与包埋盒底部平行，尤其是肿瘤组