第八章生物能学与生物氧化详解.pptVIP

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第八章生物能学与生物氧化详解演示文稿;优选第八章生物能学与生物氧化;(一)生物氧化的特点

;生物氧化和有机物在体外氧化(燃烧)的实质相同,都是脱氢、失电子或与氧结合,消耗氧气,都生成CO2和H2O,所释放的能量也相同。但二者进行的方式和历程却不同:

;(二)CO2的生成;(三)H2O的生成;;二、电子传递链(呼吸链);(一)线粒体结构特点;线粒体外膜

自由透过小分子和离子

线粒体内膜

不能自由透过大部分小分子和离子,包括H+。

含有:电子传递体(复合体I、II、III、IV)

ADP-ATP转运载体

ATP合酶(FoF1)

其他载体

线粒体基质含有丙酮酸脱氢酶系

柠檬酸循环酶系、脂肪酸-氧化酶系

DNA、核糖体、其他酶

ATP、ADP、Pi、Mg2+、Ca2+、K+、很多可溶的中间代谢产物;Cristae(嵴、theinfoldingsoftheinnermembraneofmitochondria)is

wheretherespiratory

chainislocated.

;当前第12页\共有77页\编于星期五\23点;(二)电子传递链(呼吸链)的概念;呼吸链由4个多蛋白的复合物(I,II,III,和IV;3个是质子泵)和2个移动的电子载体,泛醌(Q或辅酶Q)以及细胞色素c组成。

呼吸链中蛋白质的辅基包括:

黄素类(FMN,FAD),

血红素(血红素A,铁原卟啉IX,血红素C),

铁硫聚簇(2Fe-2S,4Fe-4S)和铜。;呼吸链上很多电子载体的顺序通过多种研究得以阐明;ElectroncarriersmayhaveanorderofincreasingE’0;方法二:氧化作用动力学研究

完全的还原伴随着O2的突然传导;

较早的氧化作用更接近呼吸链的末端;

使用快速而灵敏的分光光度技术跟随细胞色素的氧化作用,发现最大吸收峰的波长不同。;TheUVabsorptionspectraofNADandNADH.Reductionofthenicotinamideringproducesanew,broadabsorptionbandwithamaximumat340nm.TheproductionofNADHduringanenzyme-catalyzedreactioncanbeconvenientlyfollowedbyobservingtheappearanceoftheabsorbanceat340nm.;Reduced

;

方法四:分离并鉴定每个多蛋白质复合物:

链上组分中特有的电子供体和受体可以确定。

;当前第21页\共有77页\编于星期五\23点;Separationoffunctionalcomplexesoftherespiratorychain.Theoutermitochondrialmembraneisfirstremovedbytreatmentwiththedetergentdigitonin(洋地黄皂苷).Fragmentsofinnermembranearethenobtainedbyosmoticruptureofthemitochondria,andthefragmentsaregentlydissolvedinaseconddetergent.Theresultingmixtureofinnermembraneproteinsisresolvedbyion-exchangechromatographyintodifferentcomplexes(IthroughIV)oftherespiratorychain,eachwithitsuniqueproteincompositionandtheenzymeATPsynthase.TheisolatedComplexesIthroughIVcatalyzetransfersbetweendonors(NADHandsuccinate),intermediatecarriers(Qandcytochromec),andO2,asshown.Invitro,isolatedATPsynthasehasonlyATP-hydrolyzing(ATPa

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