2025年大学《分子科学与工程》专业题库—— 生物技术在DNA合成中的应用.docxVIP

2025年大学《分子科学与工程》专业题库——生物技术在DNA合成中的应用

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分）

1.DNA复制过程中，新合成的DNA链延伸的方向是？

A.5至3

B.3至5

C.5至5

D.3至3

2.下列哪种酶参与DNA复制过程中的引物合成？

A.DNA聚合酶

B.RNA聚合酶

C.DNA连接酶

D.限制性内切酶

3.PCR技术中，用于扩增目的基因的特异性引物是根据目的基因的什么序列设计的？

A.蛋白质序列

B.mRNA序列

C.核苷酸序列

D.染色体序列

4.PCR技术的变体中，巢式PCR相比普通PCR的优势是什么？

A.扩增效率更高

B.特异性更强

C.扩增产物更长

D.操作步骤更简单

5.基因克隆过程中，将目的基因插入到载体中的步骤通常使用哪种酶？

A.DNA聚合酶

B.RNA聚合酶

C.DNA连接酶

D.限制性内切酶

6.下列哪种方法不属于传统的DNA测序技术？

A.Sanger测序

B.Maxam-Gilbert测序

C.二代测序

D.基因芯片技术

7.合成生物学的主要目标是？

A.研究基因的功能

B.构建新的生物系统

C.编辑基因序列

D.测序基因

8.DNA合成过程中，dNTPs指的是什么？

A.脱氧核糖核酸三磷酸

B.核糖核酸三磷酸

C.脱氧核糖核苷酸三磷酸

D.核糖核苷酸三磷酸

9.连接酶检测反应(LDR)主要应用于什么方面？

A.基因扩增

B.基因克隆

C.基因检测

D.基因测序

10.CRISPR/Cas9技术的主要应用是什么？

A.基因扩增

B.基因克隆

C.基因编辑

D.基因测序

二、填空题（每空1分，共10分）

1.DNA复制需要多种酶的参与，其中_________酶负责解开DNA双链，_________酶负责合成新的DNA链。

2.PCR技术的核心原理是_________链的延伸。

3.基因克隆的基本步骤包括_________、_________和_________。

4.DNA测序技术的主要目的是测定DNA分子的_________序列。

5.合成生物学利用工程化的方法来设计、构建和改造_________。

三、简答题（每题5分，共20分）

1.简述PCR技术的原理及其主要步骤。

2.简述基因克隆技术的原理及其主要应用。

3.简述Sanger测序技术的原理。

4.简述合成生物学的主要研究内容和意义。

四、论述题（10分）

论述生物技术在DNA合成中的应用前景和潜在挑战。

试卷答案

一、选择题

1.A

2.B

3.C

4.B

5.C

6.D

7.B

8.C

9.C

10.C

二、填空题

1.解旋酶，DNA聚合酶

2.新生DNA

3.目的基因的获取，载体构建，转化与筛选

4.核苷酸

5.细胞

三、简答题

1.PCR（聚合酶链式反应）技术利用DNA聚合酶在体外模拟体内DNA复制过程，特异性地扩增目的DNA片段。其原理基于DNA双链解开，新链在DNA聚合酶催化下，以单链DNA为模板，按碱基互补配对原则合成。主要步骤包括：变性（加热至95℃左右，使DNA双链解开），退火（降低温度至55℃左右，引物与模板DNA结合），延伸（升高温度至72℃，DNA聚合酶以引物为起点合成新链）。重复循环，使目的片段呈指数级扩增。

2.基因克隆技术是将目的基因导入到载体（如质粒）中，并在宿主细胞中进行扩增，从而获得大量目的基因的过程。其原理是利用限制性内切酶切割载体和目的基因，产生相同的黏性末端或平末端，通过DNA连接酶将两者连接成重组质粒。然后将重组质粒转化到宿主细胞（如大肠杆菌）中，通过筛选（如抗生素抗性）获得含有目的基因的阳性克隆。主要应用包括：基因表达产物的制备，基因功能研究，基因诊断，基因治疗等。

3.Sanger测序技术（链终止法测序）利用DNA聚合酶在模板DNA指导下合成互补链，同时加入少量带有不同荧光标记的dideoxynucleotides(ddNTPs)，ddNTPs缺乏3-OH基团，一旦掺入到延伸的链中，将终止延伸。通过电泳分离不同长度的片段，根据终止片段的ddNTP种类，可确定模板链上每个核苷酸的位置，从而读取序列信息。

4.合成生物学是一