男性不育与辅助生殖技术教学.ppt

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男性不育与辅助生殖技术;“百米冲刺”;第三页,共七十八页。;男性不育定义;男性不育的概况;男性不育的病因;;男性不育的诊断

——病史;男性不育的诊断

——体格检查;男性不育症实验诊断基础;1.男性不育症实验诊断概况;男性不育症诊疗基本程序(WHO):

不育男性

病因学诊断

治疗或偿试治疗男科学

考虑ART助孕

选择最适ART助孕方式辅助生殖技术;男性不育症现代实验诊断技术

精液计算机辅助分析

精子功能检测

精液免疫生化检验

细胞遗传学检查

分子生物学

尤以精液免疫生化检验发展得最快,具有十分重要的诊断价值。;精液常规参考值

(WHOLaboratoryManual,CUP,4thedn,1999);精液异常的定义

(WHOLaboratoryManual,CUP,4thedn,1999);第十六页,共七十八页。;

生精功能评价指标:

血激素:FSH、LH、

T、PRL、E2

血清抑制素B

生殖细胞凋亡

染色体及无精子候

选基因

;常用血激素;血激素检测注意事项:

FSH浓度水平相对稳定可靠;

LH、T、PRL浓度均易产生生理波动;

应注意对抽血时间的有序把握,及注意对抽血前影响因素的控制。;;附睾分泌功能指标----精浆中性α-葡糖苷酶;精囊分泌功能指标-----精浆果糖;前列腺分泌功能指标(WHO推荐)

精浆柠檬酸定量(酶法)

(Seminalplasmacitricacid)

精浆酸性磷酸酶定量(PNPP法)

(Seminalplasmaacidphosphatase)

精浆锌定量(5-Br-PAPS法)

(Seminalplasmazinc);静止性生殖道感染性检测;精液圆细胞(rouudcell):

生殖道上皮细胞、生精细胞和白细胞

统称之。

正常精液:

圆细胞数5×106/ml;

白细胞数1×106/ml。

;抗精子抗体

anti-spermantibody

⑴血清AsAb检测指标的局限性

a)男性特有的血睾屏障对精子施行封闭式保护;

b)精子抗原的复杂性给诊断试剂的制备带来困难.

⑵精子膜表面抗体(包被抗体)检测的意义

①避免精子膜内抗原释放,反应具特异性;

②检测活力精子,更具临床意义.;⑶精子膜表面抗体检测的方法(WHO推荐)

混合凝集反应(mixedagglutinationreaction,MAR)

特点:免疫性不育过筛试验,检测IgG型抗体。

免疫珠试验(immunobeadtest,IBT)

特点:特异性较MAR更高,可进行IgG、IgA、IgM

抗体分型。;MAR、IBT结果观察;⑷男性免疫性不育的确诊

a)MAR与IBT试验结果并非经常一致。

b)男性免疫性不育的确证需要在MAR或IBT阳性基

础上附加其他试验,附加试验可以是前者的重复

试验、精子-宫颈粘液接触试验、精子-宫颈粘液

毛细管试验。

c)MAR:≥10%为可疑,50%有确定临床意义。

IBT:≥20%为可疑,50%有确定临床意义。;性交后试验;精子低渗膨胀试验(HOS);第三十二页,共七十八页。;精子顶体酶

acrosin;检测方法:

Kennedy法(BAPNA法):

精氨酸酰胺酶

BAPNA硝酰基苯胺

(BAPNA:Nα-苯甲酰-DL-精胺酸-ρ-硝酰基苯胺)

不足之处:

反应时间过长(3小时)

BAEE(苯甲酰精氨酸乙酯)法:;精子顶体酶活性检测标本留取;

顶体酶检测标本:原精液与洗涤后精子。

精子顶体酶活性检测常见实验检测错误。;精子悬液活性氧类物质(ROS)

reactiveoxygenspecies,ROS;精子形态学染色

SpermMorphologyStaining;精子形态学

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