2023年农科院分子生物学考博.pdfVIP

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l.PABP.poly(A)结合蛋白,可以结合细胞核RNA和mRNA的poIy(A)序列,许多真核生物内

部有相关类型的蛋白质…

J

2.Whatsitsfunctionofpoly(A)andhowtouseitinexperiments

mRNA3,延伸的多聚腺酸经常被描述为poly(A)尾部,有这种特性的mRNA称为poly

(A)+).poly(A)序列并非由DNA编码,在细胞核内它是在转录之后被加到RNA上的。Poly

(A)被特异的蛋白质PABP结合,有助于稳定mRNA.防止降解;作为核糖体的辨认信号,

使mRNA分子有效翻译。

在实验中的应用:具有poly(A)的mRNA在oligo(dT)引物和反转录前的作用下,可合成出双

链cDNA。随后将它与质粒载体构成重组分子,并转化给大肠杆菌寄主细胞进行扩增。应川

这种方法可以分离和扩增我们所盼望研究的基因或DNA片段。

3.T.karyoti.an.eukaryotic.

真核生物蛋白质合成与原核生物两者相比,密码相同,各种组分相似,亦有核糖体、tRNA及

各种蛋白质因子。总的合成途径也相似,有起始、延伸及终止阶段,但也有不同之处。

⑴原核生物的翻译与转录偶联在一起,即边转录边翻译;而真核生物的翻译与转录不偶联。

真核mRNA前体需经加工修饰成为成熟mRNA后,从核内输入细胞质,然后进行翻译,

⑵真核生物蛋白质合成机构比原核生物更杂,起始环节涉及起始因子众多,过程狂杂。如起

始氨基酸;核糖体组成;起始因子的种类等等。

⑶真核生物蛋白质合成的调控复杂。

⑷真核生物与原核生物的蛋白质合成可为不同的克制剂所克制。

4.WhatisTu-Tscycle

EF-Tu-GTP将氨酸-tRNA安顿在核糖体上后,以EF-Tu-GDP的形式释放。EF-Ts用来

催化GTP与GDP的置换这个反映消耗GTP,释放GDP。唯一不能被EF-Tu-GTP辨认

的氨基酸是fMt-tRNAf,两者无法结合可保证后者不能辨认内部的AUG或GUG密码子。

S.WhatdifferentfeatureshavefortheinitiatortRNA

在细菌和真核生物细胞器在tRNA起始子(initiator)携带一个氨基基团被甲酰化的甲硫氨

酸,称为氨甲酰甲硫氨酰lRNA(NformylmthionylIRNA)。这种IRNA称为iRNAf

Mt,而这种甲硫氨酰tRNA通常缩写为fMttRNAf。

tRNA氨基酸臂末端的几个面对面的碱基在fMttRNAf中是不配对的,而在其他所有

tRNA中是配对的。假如在此位置的突变使之可以配对,那么这个MttRNAf也将能参与

延伸,因此,此位置的不汜对碱基能阻止该tRNA参与延伸,并且,这种不配对特性也是甲

酰化反映所需的。

在反密码子环前面的臂上存在一系列3个GC碱基对,它是iRNAfMt所特有的,这些碱

基对是fMttRNAf直接插入到P位所必需的。

1...Th.stabilit.o.peptidyI-tRN.i.highe.tha.o.aminoacyl-tRNA,why

16SrRNA不同位点二的各种碱基被P位上的tRNA所保护。在三维结构上,也许这些

碱基是邻的。事实上』6SrRNA与P位上的IRNA比A位上的tRNA有更多的接触,这

也许是肽酰-tRNA比氨酰-tRNA具有更高稳定性的因素。

2.Htei.synthesi.a.particula.stage.b.usin.antibiotics

蛋白质LH及23SrRNA的58个碱基组成的复合体提供了一些影响GTP酶

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