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植物共生微生物群落活性成分提取研究

目录

一、内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3研究目的与目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.4研究内容与技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.1.1植物材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.1.2微生物菌种．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.1.3试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.2.1群落构建与培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

2.2.2微生物总DNA提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.2.3宏基因组构建与测序．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

2.2.4数据分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.2.5活性化合物分离纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

2.2.6化合物结构鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.2.7体外活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

三、结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

3.1植物共生微生物群落特征分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

3.1.1群落组成与多样性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

3.1.2功能基因分布．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

3.2活性化合物提取与分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51

3.2.1化合物提取方法优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

3.2.2主要活性化合物分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

3.3活性化合物结构鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

3.3.1化合物结构推测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59

3.3.2结构确认．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60

3.4活性化合物生物活性评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．63

3.4.1抑菌活性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．67

3.4.2抗氧化活性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．72

3.4.3抗癌活性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．74

3.4.4其他活性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．76

四、讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．79

4.1植物共生微生物群落特征分析结果讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．80

4.2活性化合物提取与分离方法讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．84

4.3活性化合物结构与生物活性关系讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．