DB37_T 4711-2024 海洋动物资源线粒体DNA遗传多样性监测技术规程.docxVIP

ICS07.080CCSZ06

37

山东省地方标准

DB37/T4711—2024

海洋动物资源线粒体DNA遗传多样性监测

技术规程

CodeofpracticeformonitoringmitochondrialDNAgeneticdiversityofmarine

animalresources

2024-04-11发布2024-05-11实施

山东省市场监督管理局发布

I

DB37/T4711—2024

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4监测程序 1

5监测方案设计 2

6样品采集、保存与运输 2

6.1采样地点 2

6.2采样数量及方法 2

6.3采样记录 3

6.4样品保存与运输 3

7样品检测 3

7.1方法原理 3

7.2DNA提取 3

7.3DNA质量检测 3

7.4引物选择 3

7.5DNA扩增 4

7.6PCR产物回收、纯化与序列测定 4

8质量控制 4

9数据分析 4

10监测报告 4

附录A（资料性）样品采集记录 5

附录B（资料性）设备与试剂 6

B.1仪器设备与耗材 6

B.2试剂及其配制 6

附录C（资料性）酚-氯仿法提取DNA 7

附录D（资料性）琼脂糖凝胶电泳 8

附录E（资料性）PCR扩增反应体系 9

附录F（资料性）检测记录 10

参考文献 11

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II

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由山东省海洋局提出并组织实施。

本文件由山东省海洋标准化技术委员会归口。

DB37/T4711—2024

1

海洋动物资源线粒体DNA遗传多样性监测技术规程

1范围

本文件确立了海洋动物资源线粒体DNA遗传多样性监测程序，规定了监测方案设计、样品采集、保存与运输、样品检测、质量控制、监测报告等技术要求，描述了数据分析方法。

本文件适用于海洋动物资源的遗传多样性监测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T12763.6海洋调查规范第6部分：海洋生物调查

GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

遗传多样性geneticdiversity

种内不同群体之间或一个群体内不同个体的遗传变异总和。

4监测程序

海洋动物资源线粒体DNA遗传多样性监测程序包括监测方案设计、样品采集、保存与运输、样品检测、质量控制、数据分析、监测报告，程序见图1。

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2

图1监测程序图

5监测方案设计

明确监测海域、监测周期、监测时间、样品采集、保存和运输、样品检测方法、监测指标、质量控制、数据分析、监测报告等。其中，对调查海域某种野生海洋动物资源的遗传多样性监测，宜每5年~10年开展1次；对人工增殖物种宜每年开展1次。

6样品采集、保存与运输

6.1采样地点

采样地点可根据调查需求选择：

a)现场调查采样：按GB/T12763.6规定执行。对海洋底栖动物、潮间带动物进行定点采样，对移动迅速的底栖动物可设地笼诱捕。对游泳能力强的鱼类、甲壳类等进行拖网采样；

b)非现场调查采样：从调查海域捕捞作业船、渔港或市场直接采集来自目标海域的新鲜渔获物，采样方法按GB/T18654.2规定执行。

6.2采样数量及方法

按形态学分类后，每个调查海域应采集同一物种30个以上独立个体作为一批样品；保护动物和珍稀濒危动物难以达到该数量的，可积累该海域一定时期内多次调查采集的不同个体，以实际采集到的个体数为准。根据监测对象不同，可分别选择以下采样方法：

a)通常采取海洋动物整体；

b)对大型海洋动物实行部分采