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移液枪正确使用方法及常见问题汇总
在实验室的日常操作中,移液枪作为精确量取液体的核心工具,其使用的规范性直接关系到实验结果的准确性与可靠性。无论是基础的分子生物学实验还是复杂的化学分析,熟练掌握移液枪的正确使用方法,并能及时识别和解决使用过程中出现的常见问题,都是每一位实验人员必备的基本技能。本文将系统阐述移液枪的规范操作流程,并对实践中易出现的问题进行梳理与剖析,旨在为实验工作者提供一份实用的操作指南。
一、移液枪的正确使用方法
(一)前期准备与检查
在开始移液操作前,首要任务是根据实验所需移取的体积范围,选择合适量程的移液枪。通常,移液枪的最佳移液体积为其量程的中段至上限之间,以确保最佳的精确度。例如,需要移取X毫升液体时,应优先选择最大量程不超过X毫升两倍的移液枪。
安装吸头是关键的一步,需选择与移液枪型号匹配的优质吸头。将移液枪的枪头圆锥体部分垂直插入吸头,适度用力并轻微旋转,确保吸头与枪头圆锥体之间形成紧密且无间隙的密封。安装时避免用力过猛导致枪头圆锥体受损,同时也要防止吸头安装过松,以免影响移液精度或导致漏液。
使用前需检查移液枪外观是否完好,活塞按钮的按压与回弹是否顺畅,有无卡顿现象。若长期未使用或怀疑其准确性,应进行校准。
(二)体积设定
根据实验需求,在移液枪的量程范围内设定所需体积。调节体积时,应缓慢旋转体积调节旋钮,避免快速旋转导致刻度指示不准确。当从大体积调节至小体积时,直接旋转至目标刻度即可;若从小体积调至大体积,建议先调超过目标刻度约一圈,再回调至目标体积,以消除内部机械间隙可能带来的误差。设定完成后,务必仔细核对刻度指示,确保无误。
(三)吸液操作
常见的吸液方法有正压式吸液和反向吸液法,应根据所移取液体的性质选择合适的方法。
正压式吸液法(适用于水相溶液、粘度正常的液体):
1.手持移液枪,垂直握持,将吸头尖端浸入液面以下适当深度。对于微量移液枪(如小于200微升),浸入深度通常为1-2毫米;对于大容量移液枪,可适当加深,但应避免吸头外壁沾附过多液体。
2.缓慢、平稳地按压操作按钮至第一停点(感受明显阻力处),此时移液枪内部形成负压。
3.保持按钮按压状态,将吸头在液体中停留1-2秒(对于高粘度液体需适当延长),然后缓慢、平稳地松开按钮,使液体被吸入吸头。注意松开速度不宜过快,以免产生气泡或导致液体飞溅。
4.吸液完成后,将吸头缓慢移出液面,若吸头外壁沾有液体,可用无屑擦纸轻轻擦拭吸头尖端的外侧,但切勿触碰吸头开口,以免带走吸头内的液体或污染吸头。
反向吸液法(适用于高粘度液体、易起泡液体或生物活性样品):
1.首先将操作按钮按压至第二停点(即超过第一停点的最大按压位置)。
2.将吸头浸入液体,然后缓慢松开按钮至初始位置,使更多的液体被吸入吸头。
3.分液时,仅将按钮按压至第一停点,吸头内会残留一部分液体,这部分液体应废弃,不可再用于移取。
(四)分液操作
将吸头尖端靠在接收容器内壁的适当位置,通常为容器内壁与液面(若已有液体)或接近容器底部的位置,保持移液枪垂直或略微倾斜。
缓慢按压操作按钮至第一停点,待液体完全流出后,保持按压状态1-2秒,使吸头内的液体充分排出。对于正向移液法,若吸头尖端有残留液滴,通常是设计允许的,无需吹出。而对于某些型号的移液枪或特定吸头(如标注“ToDeliver”或“TD”且需要吹出残留液的),则需在按压至第一停点后,继续按压至第二停点,将残留液体吹出。具体操作需参照所使用移液枪的说明书。
完成分液后,将移液枪移开接收容器,缓慢松开操作按钮,使其回弹至初始位置。
(五)使用后处理与维护
移液操作完成后,应及时卸下吸头。通过按下吸头弹射按钮,将使用过的吸头弹入专用的废弃物容器中。注意避免用手直接接触污染的吸头。
日常使用后,应用75%乙醇擦拭移液枪的外表面,特别是枪头圆锥体部分,以防止交叉污染。若不慎有液体溅到枪身上,应立即擦拭干净。
定期对移液枪进行清洁保养,如拆卸可清洗部件进行清洗(参照说明书),并在活塞等活动部件处涂抹少量专用润滑剂(注意不可滥用润滑剂,以免污染样品)。移液枪应存放于专用的枪架上,保持竖直状态,避免水平放置或倒置,防止内部精密部件受损或润滑油泄漏。
二、常见问题汇总与解决方案
(一)移液不准确或精度下降
这是最常见的问题之一,可能由多种因素引起。
*吸头问题:吸头与枪头圆锥体不匹配或安装不紧密,导致漏气。解决方法:确保使用原装或认证的匹配吸头,并正确安装,安装后轻拉吸头检查是否牢固。吸头本身质量不佳,如孔径不均匀或有裂缝,也会影响精度,应更换优质吸头。
*操作手法不当:吸液时按钮按压或松开速度过快,易产生气泡或导致液体过多吸入;吸头浸入液体过深或过浅;分液时吸头离开液面过早或按压按钮不彻底。解决方法:规范
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