《生物制药工艺学》ppt上复习题整理2.pdfVIP

《生物制药工艺学》ppt上复习题整理2.pdf

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第十章离心技术

离心技术:利用旋转产生的离心力代替重力,加速物质的沉降速度,使具有不同沉降速

度的物质进行分离的一种技术

离心力:centrifugalforce,Fc在一定角度速度下作圆周运动的任何物体都受到的

2r与颗粒质量m的乘积,即:

向外的力。离心力(Fc)的大小等于离心加速度ω

F=mω

2r

相对离心力:relativecentrifugalforceRCF颗粒在离心过程中的离心力相对于颗

粒本身所受的重力。

沉降速度:即在离心力作用下,物质粒子于单位时间内沿离心力方向移动的距离

沉降系数概念:在单位离心力场中,颗粒的沉降速度谓之“沉降系数”

2

2

4

相对离心力的计算:Nrm

RCF

-52

3600mg1.11810Nrxg

2

2

4

N

r

3600

980

影响沉降速度的因素:颗粒大小、颗粒密度、溶液黏度

制备型离心机常用的转子:角度转子,水平转子,区带转子,垂直管转子,连续离心

转子,细胞洗脱转子(适于自动植物培养液或发酵液中连续分离单细胞和菌体)

角度转子水平转子

离心时间短长

寿命长短

运转平稳低速易摇摆

壁效应强弱

适用差速离心密度梯度离心

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差分离心法:差分离心法亦称为“差速离心法”,是依据不同大小和密度的颗粒在离心

力场中沉降速度的不同进行离心分离的一项技术

速度区带离心法:将样品液置于连续或不连续,线性或非线性密度梯度液上(如蔗糖、

甘油、KBr、CsCl等),控制离心时间,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯

度层内分成一系列区带,从而达到彼此分离的目的

特点:(1)介质的密度亦须严格掌握:梯度最大值≤组分最小密度。

(2)样品加于梯度介质的顶部、离心时间须严格控制。

(3)样品的密度<梯度密度最小值。

(4)分离依据是各组分之沉降系数差。

(5)分辨率受组分沉降系数,离心时间,颗粒扩散系数,介质粘度及梯度范围和形状

的影响。

(6)适于分离颗粒大小不同而密度相近或相同的组分,如DNA与RNA混合物、核蛋

白体亚单位及线粒体、溶酶体及过氧化物酶体等

等密度离心法:离心力作用下,不同密度的多组分颗粒在梯度介质中“向

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