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第十五章生物制品
试叙述基因工程药物的一般制备过程。
获得目的基因--DNA的体外重组（切与连）；载体的选择受体细胞的选择--重组DNA
分子转化（转）--转化子的筛选与鉴定（选）--外源基因的大规模表达和分离纯化--产
品的检验和制剂制备
掌握单抗的制备过程：瘤细胞NS-1可培养生长；B细胞可分泌抗体细胞融合（PEG）
初步筛选（HAT）专一性筛选（ELISA）单株化杂交瘤细胞抗体生产
简述病毒类疫苗的一般制备方法：1.毒种的选择和减毒;要求：有抗原性；有典型形
态和感染特定组织的特性；易培养繁殖；不产生其他毒素；稳定，无恢复致病力现象；
未被污染2.病毒的培养和繁殖3.疫苗的灭活(有的用甲醛，有的用酚溶液)4.疫苗的纯
化5.冻干
病毒类疫苗制备过程中，病毒的扩增方法有哪些？
动物培养(Animals)、鸡胚培养（Embryonatedeggs）,组织培养（Organ
andtissueculture）、细胞培养
生物制品可分为哪些类别，请举例说明之。
疫苗(Vaccine):蛋白质、多糖、核酸活载体，感染因子
抗毒素及免疫血清:破伤风抗毒素、抗狂犬病血清
血液制品(BloodProducts):如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子(天然或重组
的)、红细胞浓缩物
细胞因子(Cytokines)及重组ＤＮＡ产品:干扰素(ＩＦＮ)、白细胞介素(ＩＬ)、集落刺
激因子(ＣＳＦ)、红细胞生成素(ＥＰＯ)
诊断制品:免疫诊断试剂盒
其它制品:如治疗用Ａ型肉毒素制剂、微生态制剂和卡介菌多糖、核酸制剂
基因工程技术中，目的基因的获得有哪些方法？
1、鸟枪法（基因文库）基因组DNA提取→限制性内切酶部分水解→与载体连接→转
化、扩增与筛选2、逆转录法（cDNA文库）mRNA纯化→cDNA第一合成→第二链
合成→cDNA克隆→将重组体导入宿主细胞→cDNA文库鉴定→目的cDNA克隆的分
离和鉴定
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病毒载体生物学特性适用范围
Exvivo基因治疗
反转录病毒载体可感染分裂细胞；
整合到染色体中肿瘤基因治疗
表达时间长
有致癌的危险
可感染分裂和非分裂细胞Invivo基因治疗
腺病毒载体
不整合到染色体中肿瘤基因治疗
外源基因表达水平高疫苗
表达时间较短
免疫原性强
可感染分裂和非分裂细胞Invivo基因治疗
AAV病毒载体
整合到染色体中Exvivo基因治疗
无致病性；免疫原性弱；遗传疾病的治疗
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