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再生医学qPCR检测工程师岗位考试试卷及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.qPCR中“q”代表什么？

A.qualityB.quantityC.queryD.quick

答案：B

2.以下哪种不是qPCR常用的荧光定量方法？

A.染料法B.探针法C.比色法D.TaqMan探针法

答案：C

3.qPCR反应体系中，Taq酶的作用是？

A.解链DNAB.连接DNAC.合成DNAD.降解DNA

答案：C

4.进行qPCR实验时，RNA提取后首先要进行？

A.反转录B.直接扩增C.加样D.离心

答案：A

5.标准曲线的横坐标一般是？

A.Ct值B.荧光强度C.模板浓度D.扩增效率

答案：C

6.理想的qPCR扩增效率接近？

A.50%B.100%C.150%D.200%

答案：B

7.qPCR实验中，阴性对照的作用是？

A.检测污染B.确定扩增效率C.优化条件D.评估灵敏度

答案：A

8.以下哪种物质不属于qPCR反应缓冲液成分？

A.Tris-HClB.MgCl?C.SDSD.dNTPs

答案：C

9.进行qPCR实验，样本的保存温度一般是？

A.4℃B.-20℃C.-80℃D.室温

答案：C

10.qPCR技术可以用于检测？

A.DNA含量B.RNA含量C.基因表达水平D.以上都是

答案：D

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.qPCR实验中影响结果准确性的因素有？

A.样本质量B.引物设计C.反应条件D.仪器性能

答案：ABCD

2.反转录过程需要用到的物质有？

A.逆转录酶B.dNTPsC.引物D.Mg2?

答案：ABCD

3.以下属于qPCR优点的是？

A.灵敏度高B.特异性强C.可定量D.操作简单

答案：ABC

4.设计qPCR引物时需要考虑的因素有？

A.引物长度B.退火温度C.GC含量D.引物二聚体

答案：ABCD

5.qPCR实验中，常用的内参基因有？

A.GAPDHB.β-actinC.18SrRNAD.P53

答案：ABC

6.荧光定量PCR仪的主要部件包括？

A.热循环系统B.荧光检测系统C.数据分析系统D.进样系统

答案：ABC

7.实验中导致qPCR扩增失败的原因可能是？

A.引物错误B.模板降解C.Taq酶失活D.荧光染料失效

答案：ABCD

8.qPCR可以应用于哪些领域？

A.疾病诊断B.药物研发C.基因功能研究D.食品安全检测

答案：ABCD

9.优化qPCR反应条件包括？

A.调整退火温度B.改变Mg2?浓度C.优化引物浓度D.更换Taq酶品牌

答案：ABC

10.下列哪些物质可作为qPCR反应的模板？

A.基因组DNAB.cDNAC.线粒体DNAD.叶绿体DNA

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.qPCR实验对样本纯度要求不高。（×）

2.荧光定量PCR只能检测mRNA水平。（×）

3.标准曲线的线性关系越好，实验结果越准确。（√）

4.引物的退火温度越高越好。（×）

5.qPCR反应体系中，dNTPs浓度越高扩增效果越好。（×）

6.实验中可以用自来水配制反应缓冲液。（×）

7.反转录产物可直接用于qPCR扩增。（√）

8.荧光定量PCR仪不需要定期校准。（×）

9.内参基因在不同组织和细胞中表达量恒定。（√）

10.qPCR实验不需要设置重复孔。（×）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述qPCR相对定量和绝对定量的区别。

答案：相对定量是比较不同样本中目的基因表达量的相对变化，常以内参基因做校正，反映基因表达的变化倍数。绝对定量则是精确测定样本中目的基因的实际拷贝数，需要构建标准曲线，用已知浓度的标准品来推算未知样本中基因的含量。

2.简述RNA提取过程中的注意事项。

答案：RNA提取要防止RNA酶污染，操作需在无RNA酶环境，使用的耗材和试剂要经过处理。提取时注意样品的新鲜度，快速匀浆裂解。严格控制各步骤的温度和时间，如离心条件等。提取后尽快进行后续实验或妥善保存，防止RNA降解。

3.引物设计不合理可能会导致哪些问题？

答案：引物设计不合理可能导致引物二聚体形成，消耗反应体系中的dNTPs和引物，影响扩增效率；可能出现非特异性扩增，导致扩增出非目的条带；退火温度不合适，过高可能引物与模板结合不佳，过低则会增加非特异性结合，影响实验结果准确性。

4.简述qPCR实验中设置阴性对照和阳性对照的意义。

答案：阴性对照可检测实验过程是否存在污染，若阴性对照有扩增信号，说明实验体系或操作有污染。阳性对照用于验证实验体系的有效性，若阳性对照无扩增信号，表明反应体系、仪器等可能存在问题，通过两者可保障实验结果的可靠性。

五、讨论题（每题5分，共4题）

1.在再生医学研究中，qPCR技术用于检测干细胞分化相关基因表达，如何确保实验结果能准确反映干细胞分化