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再生医学NK细胞培养技术员岗位考试试卷及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.NK细胞培养常用的基础培养基是（）

A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.F12

2.培养NK细胞时，添加的血清一般为（）

A.小牛血清B.胎牛血清C.马血清D.人血清

3.NK细胞培养的适宜温度是（）

A.35℃B.37℃C.39℃D.40℃

4.细胞计数时常用的染料是（）

A.结晶紫B.台盼蓝C.甲基绿D.伊红

5.培养NK细胞的气体环境中CO?浓度一般为（）

A.2%B.5%C.8%D.10%

6.以下哪种物质可用于激活NK细胞（）

A.IL-2B.IL-4C.IL-6D.IL-8

7.进行细胞培养时，超净工作台需提前开机多久进行紫外消毒（）

A.10分钟B.20分钟C.30分钟D.60分钟

8.培养NK细胞的器皿通常用什么方法灭菌（）

A.干热灭菌B.湿热灭菌C.化学消毒D.过滤除菌

9.NK细胞属于（）

A.T淋巴细胞B.B淋巴细胞C.固有免疫细胞D.吞噬细胞

10.细胞冻存时常用的保护剂是（）

A.甘油B.DMSOC.乙醇D.丙酮

多项选择题（每题2分，共10题）

1.影响NK细胞培养的因素有（）

A.培养基成分B.血清质量C.气体环境D.培养温度

2.以下哪些操作需要在无菌条件下进行（）

A.细胞接种B.培养基配制C.细胞收获D.试剂添加

3.培养NK细胞所需的设备有（）

A.二氧化碳培养箱B.超净工作台C.离心机D.显微镜

4.细胞培养过程中可能出现的污染类型有（）

A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染

5.用于检测NK细胞活性的方法有（）

A.乳酸脱氢酶释放法B.流式细胞术C.MTT法D.免疫荧光法

6.细胞冻存的步骤包括（）

A.配制冻存液B.收集细胞C.梯度降温D.液氮保存

7.培养NK细胞的培养基中可能添加的成分有（）

A.氨基酸B.维生素C.葡萄糖D.抗生素

8.以下哪些是NK细胞的功能（）

A.杀伤肿瘤细胞B.抗病毒感染C.调节免疫D.分泌抗体

9.细胞培养过程中，换液的目的是（）

A.补充营养物质B.去除代谢废物C.维持适宜的pH值D.防止细胞老化

10.检测细胞密度的方法有（）

A.血细胞计数板计数B.流式细胞仪计数C.比浊法D.荧光定量法

判断题（每题2分，共10题）

1.NK细胞培养过程中不需要添加抗生素。（）

2.细胞培养所用的器皿可以不经过灭菌处理。（）

3.提高培养温度一定能促进NK细胞生长。（）

4.血清在细胞培养中主要起提供营养和缓冲的作用。（）

5.台盼蓝染色后，活细胞会被染成蓝色。（）

6.二氧化碳培养箱的作用只是提供适宜的温度。（）

7.培养NK细胞时，细胞传代次数越多越好。（）

8.细胞冻存复苏后，其活性不会受到影响。（）

9.只要在超净工作台内操作，就不会发生细胞污染。（）

10.NK细胞只能来源于外周血。（）

简答题（每题5分，共4题）

1.简述NK细胞培养的基本流程。

答案：准备适宜培养基及添加物，配制含血清、抗生素等的完全培养基；采集外周血等来源细胞样本，分离出NK细胞；将细胞接种于培养瓶，置于适宜温度、气体环境的培养箱培养；期间适时换液、观察细胞生长状态；细胞生长到一定密度时进行传代。

2.简述细胞污染的常见原因及预防措施。

答案：常见原因有操作环境不无菌、器皿未严格灭菌、试剂污染等。预防措施：严格进行操作环境及器皿的消毒灭菌；使用无菌试剂；规范实验操作，在超净工作台内按无菌要求操作；定期检测培养环境及细胞状态。

3.简述冻存NK细胞的意义。

答案：可长期保存NK细胞，避免细胞在连续培养中发生遗传特性改变、老化及污染等问题；方便在需要时复苏使用，保证细胞的活性和功能；对于研究、临床应用等，能随时提供质量稳定的细胞资源，利于实验的重复性和连贯性。

4.简述检测NK细胞活性的意义。

答案：能评估NK细胞的功能状态，了解其对肿瘤细胞、病毒感染细胞等靶细胞的杀伤能力；在免疫治疗中，可监测治疗效果，判断NK细胞疗法是否有效；研究免疫相关疾病时，有助于分析疾病发生发展过程中NK细胞功能的变化。

讨论题（每题5分，共4题）

1.讨论如何提高NK细胞培养的产量和质量。

答案：优化培养基配方，选择合适血清和添加生长因子；控制培养条件如温度、气体、pH精准稳定；采用合适培养方式，如悬浮培养或特殊培养体系；定期检测细胞状态，及时处理污染等问题；合理传代，避免细胞老化。

2.讨论NK细胞培养过程中遇到细胞生长缓慢的可能原因及解决方法。

答案：可能原因有培养基营养不足、血清质量差、培养条件不适宜、细胞初始状态不佳等。解决方法：更换优质培养基和血清，调整培养温度、气体等条件，对细胞进行复苏优化，添加促进细胞生长的因子，排查是否有潜在污染并处理。

3.讨论在临床应用中，NK细胞培养技术