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再生医学造血干细胞扩增技术员岗位考试试卷及答案
单项选择题(每题2分,共10题)
1.造血干细胞主要存在于()
A.外周血B.骨髓C.肝脏D.脾脏
2.体外扩增造血干细胞常用的培养基是()
A.DMEMB.RPMI1640C.IMDMD.MEM
3.以下哪种细胞因子可促进造血干细胞增殖()
A.TNF-αB.IFN-γC.SCFD.IL-10
4.造血干细胞的表面标志是()
A.CD34+B.CD4+C.CD8+D.CD19+
5.进行造血干细胞扩增实验时,细胞培养箱的气体条件是()
A.5%CO?,95%O?B.5%CO?,95%空气
C.10%CO?,90%空气D.10%CO?,90%O?
6.用于细胞计数的仪器是()
A.酶标仪B.流式细胞仪C.血细胞分析仪D.显微镜
7.下列哪种物质可作为冷冻保护剂保存造血干细胞()
A.乙醇B.甘油C.甲醛D.丙酮
8.造血干细胞扩增过程中,定期换液的目的不包括()
A.补充营养物质B.去除代谢废物
C.调节细胞密度D.增加细胞活性
9.无菌操作时,常用的消毒试剂是()
A.75%酒精B.95%酒精C.碘伏D.新洁尔灭
10.以下哪种细胞不属于造血干细胞分化的细胞()
A.红细胞B.淋巴细胞C.成纤维细胞D.单核细胞
多项选择题(每题2分,共10题)
1.影响造血干细胞体外扩增的因素有()
A.细胞因子B.培养基成分C.培养温度D.细胞接种密度
2.常用的细胞培养基本条件包括()
A.合适的培养基B.适宜的温度C.气体环境D.无菌操作
3.以下哪些细胞因子与造血干细胞相关()
A.IL-3B.IL-6C.GM-CSFD.EPO
4.无菌操作过程中,需要注意()
A.实验器材消毒B.操作环境清洁C.个人防护D.试剂无菌处理
5.造血干细胞的特性有()
A.自我更新能力B.多向分化潜能C.数量众多D.体积较大
6.细胞冻存的步骤包括()
A.配制冻存液B.细胞收集C.梯度降温D.液氮保存
7.用于检测造血干细胞扩增效果的方法有()
A.细胞计数B.流式细胞术检测表面标志C.克隆形成实验D.形态学观察
8.造血干细胞可以从以下哪些来源获取()
A.骨髓B.外周血C.脐带血D.胎盘
9.细胞培养过程中,可能出现的污染类型有()
A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染
10.以下属于细胞培养常用设备的有()
A.细胞培养箱B.超净工作台C.离心机D.冰箱
判断题(每题2分,共10题)
1.造血干细胞只能分化为血细胞。()
2.细胞培养过程中,CO?的作用是维持培养液的pH。()
3.所有细胞因子都能促进造血干细胞扩增。()
4.进行无菌操作时,手可直接接触培养皿内部。()
5.造血干细胞在体外可以无限扩增。()
6.冻存的造血干细胞复苏后活性不受影响。()
7.细胞计数时,只需要计数视野内的所有细胞。()
8.培养基中添加血清的主要目的是提供营养物质。()
9.流式细胞仪只能检测细胞的表面标志。()
10.从外周血获取造血干细胞比骨髓获取更简便。()
简答题(每题5分,共4题)
1.简述造血干细胞体外扩增的基本流程。
首先获取造血干细胞来源(骨髓、外周血、脐带血等),对其进行分离纯化得到造血干细胞。将细胞接种到含有合适培养基、细胞因子等的培养体系中,置于适宜温度(37℃左右)、气体环境(5%CO?,95%空气)的细胞培养箱内培养,培养过程中定期换液、观察细胞生长状态,最后对扩增的细胞进行检测分析。
2.列举三种常见的细胞因子及其对造血干细胞的作用。
SCF(干细胞因子):促进造血干细胞的存活、增殖和分化;IL-3:刺激多种造血祖细胞的增殖和分化;GM-CSF(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子):促进粒细胞、巨噬细胞等的生成和分化。
3.无菌操作在造血干细胞扩增实验中的重要性及主要措施。
无菌操作重要性在于防止微生物污染细胞培养体系,避免影响细胞生长、扩增及实验结果准确性。主要措施有:对实验器材如培养皿、吸管等进行高温高压灭菌;操作环境如超净工作台用紫外线消毒;试剂要无菌处理;操作人员穿戴无菌工作服、口罩、手套,在酒精灯火焰旁操作。
4.简述细胞冻存和复苏的要点。
细胞冻存要点:配制含保护剂(如DMSO)的冻存液,收集对数生长期细胞,调整细胞密度,缓慢梯度降温(如先-20℃,再-80℃,最后液氮保存)。复苏要点:快速将冻存管从液氮中取出,放入37℃水浴中迅速解冻,然后将细胞转移至含培养基的培养瓶中,培养观察细胞生长情况。
讨论题(每题5分,共4题)
1.讨论目前造血干细胞扩增技术面临的挑战及可能的解决方法。
挑战:扩增效率有限,难以满足临床大量需求;细胞扩增过程中可能出现分化失控、细胞活性降低等问题;培养体系复杂,成本较高。解决方法:研发更有效的细胞因子组合或小分子化合物促进扩增;优化培
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