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再生医学脂肪干细胞培养技术员岗位考试试卷及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.脂肪干细胞培养常用的基础培养基是（）

A.DMEMB.RPMI1640C.McCoys5AD.F12

2.培养细胞时，常用的血清是（）

A.小牛血清B.胎牛血清C.马血清D.羊血清

3.细胞培养箱的气体环境一般是（）

A.5%CO?，95%O?B.10%CO?，90%空气

C.5%CO?，95%空气D.20%O?，80%空气

4.用于消化脂肪组织获取干细胞的酶是（）

A.胰蛋白酶B.胶原酶C.胃蛋白酶D.脂肪酶

5.脂肪干细胞传代时，合适的细胞密度一般是（）

A.50%-60%B.70%-80%C.80%-90%D.90%-100%

6.检测细胞活性常用的试剂是（）

A.台盼蓝B.结晶紫C.中性红D.伊红

7.培养细胞的操作应在（）内进行。

A.超净工作台B.通风橱C.普通实验室D.无菌室

8.冻存细胞时，常用的冻存液成分不包括（）

A.DMSOB.甘油C.血清D.抗生素

9.脂肪干细胞在体外培养可分化为（）

A.神经元B.心肌细胞C.脂肪细胞D.红细胞

10.细胞培养用水一般要求达到（）

A.蒸馏水级别B.去离子水级别C.双蒸水级别D.超纯水级别

多项选择题（每题2分，共10题）

1.脂肪干细胞培养所需的基本设备有（）

A.细胞培养箱B.超净工作台C.离心机D.倒置显微镜

2.影响脂肪干细胞培养的因素包括（）

A.培养基成分B.血清质量C.培养温度D.气体环境

3.下列属于无菌操作技术的有（）

A.实验前用酒精擦拭超净台B.操作人员戴无菌手套

C.培养基高压灭菌D.细胞培养瓶紫外照射

4.脂肪干细胞的鉴定方法有（）

A.形态学观察B.流式细胞术C.免疫荧光D.基因检测

5.细胞冻存的注意事项有（）

A.缓慢降温B.标记清楚C.冻存液现配现用D.定期复苏检测

6.血清在细胞培养中的作用有（）

A.提供营养物质B.促进细胞贴壁C.缓冲pHD.抑制微生物生长

7.培养脂肪干细胞时，可能用到的耗材有（）

A.培养瓶B.吸管C.离心管D.滤器

8.细胞污染的类型包括（）

A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染

9.脂肪干细胞培养过程中，换液的目的是（）

A.补充营养B.去除代谢废物C.调节pHD.防止细胞老化

10.体外诱导脂肪干细胞分化的方法有（）

A.添加诱导因子B.改变培养条件C.基因编辑D.共培养

判断题（每题2分，共10题）

1.脂肪干细胞培养不需要严格的无菌操作。（）

2.培养基中血清浓度越高对细胞生长越好。（）

3.细胞培养箱的温度应保持在37℃。（）

4.消化脂肪组织获取干细胞时，酶消化时间越长越好。（）

5.传代细胞时，细胞密度过低不利于细胞生长。（）

6.台盼蓝染色后，活细胞会被染成蓝色。（）

7.冻存细胞可以直接放入-80℃冰箱。（）

8.脂肪干细胞只能分化为脂肪细胞。（）

9.超净工作台使用后不需要关闭风机。（）

10.细胞培养用水的纯度对细胞生长影响不大。（）

简答题（每题5分，共4题）

1.简述脂肪干细胞培养的基本流程。

答：获取脂肪组织，用胶原酶消化，离心收集细胞，接种到含合适培养基和血清的培养瓶中，置于37℃、5%CO?培养箱培养，定期换液，细胞长满后传代。

2.无菌操作在脂肪干细胞培养中的重要性是什么？

答：无菌操作可防止微生物污染细胞，微生物污染会消耗营养、产生毒素，影响细胞生长、增殖甚至导致细胞死亡，确保培养体系纯净才能保证实验结果准确可靠。

3.如何判断脂肪干细胞培养是否成功？

答：可通过观察细胞形态是否正常，呈梭形、贴壁生长；检测细胞活性，活性高说明状态较好；看细胞增殖能力，能正常传代；还可通过鉴定方法，如流式等确认细胞特性。

4.简述细胞冻存的意义。

答：细胞冻存可保存细胞资源，避免因污染、意外等损失细胞；方便长期研究，随时复苏使用；保持细胞原有特性，为后续实验提供稳定材料。

讨论题（每题5分，共4题）

1.讨论在脂肪干细胞培养过程中遇到细胞生长缓慢的可能原因及解决办法。

答：原因可能是培养基营养不足，可更换培养基；血清质量不佳，换优质血清；培养条件不合适，如温度、CO?浓度不对，检查培养箱参数。也可能细胞密度不当，调整接种密度；还可能有潜在污染，排查并处理。

2.探讨脂肪干细胞培养在再生医学领域的应用前景和面临的挑战。

答：前景在于可用于组织修复、器官再生等。但面临挑战，如培养技术标准化不足，不同实验室结果差异大；细胞来源和质量不稳定；安全性问题，如致瘤风险等，需要深入研究解决。

3.结合实际，谈谈如何保证脂肪干细胞培养实验结果的可重复性。

答：要严格规范操作流程，从取材、消化、培养条件等都按标准执行；使用质量稳定的试剂、耗材；操作人员技术熟练且固定；做好实验记录，包括温度、时间等细节，便于追