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BCG对人外周血来源树突状细胞miRNA表达谱的影响：机制与验证研究

一、引言

1.1研究背景与意义

卡介苗（BCG）作为一种由减毒牛型结核杆菌悬浮液制成的活菌苗，在免疫领域发挥着重要作用。自1921年诞生以来，BCG被广泛应用于结核病的预防，它能够增强巨噬细胞活性，加强巨噬细胞杀灭肿瘤细胞的能力，活化T淋巴细胞，进而增强机体细胞免疫的功能。在全球范围内，BCG的接种在控制结核病传播方面取得了一定成效，特别是对儿童结核性脑膜炎和播散性结核具有较好的保护作用。然而，BCG在成人肺结核预防中的保护效力仅为50%-80%，且效力会随时间（10-20年）显著衰退，这可能与成人免疫系统对BCG的Th1型免疫反应减弱、环境分枝杆菌干扰以及全球不同BCG株的免疫原性差异等因素有关。

树突状细胞（DC）则是人体内起着关键免疫作用的特殊细胞，也是功能最强的专职性抗原提呈细胞（APC）。其细胞膜上伸出许多类似于神经细胞的树突状突起，因而得名。DC细胞虽然在体内的数量很少，仅占人外周血单个核细胞的1%，但其具有强大的抗原摄取、加工处理和递呈能力，能够高效地识别并摄取外来抗原，随后将处理过的抗原递呈给T细胞，从而激活和启动免疫反应。未成熟的DC细胞具有较强的迁移能力，能够迅速迁移到感染或炎症部位，摄取并处理抗原；而成熟的DC细胞则能有效激活初始型T细胞，启动、调控并维持免疫应答。DC细胞在免疫系统中参与适应性免疫应答的诱导和启动、维持免疫耐受、调节自身免疫反应等，还通过分泌多种细胞因子和趋化因子，参与免疫功能的调节和免疫细胞的趋化作用。

微小RNA（miRNA）是一类由内源基因编码的长度约为22-24个核苷酸的非编码RNA分子，大多数miRNA基因以单拷贝、多拷贝或基因簇的形式存在于基因组中。miRNA可以通过破坏靶mRNA的稳定性、抑制靶mRNA的翻译来对靶mRNA发挥调控作用。越来越多的研究表明，miRNA在免疫细胞的发育、分化和功能调节中扮演着关键角色，其表达异常与多种疾病的发生发展密切相关。

BCG对DC的作用涉及复杂的免疫调节过程，研究BCG对人外周血来源DC的miRNA表达谱的影响，有助于从分子层面深入理解BCG免疫调节的机制。这不仅能够为揭示BCG免疫调节的分子机制提供关键线索，丰富我们对免疫调节网络的认识，还可能发现新的免疫调节靶点。基于这些靶点，我们能够开发更加精准有效的免疫治疗策略，为结核病以及其他相关疾病的防治提供新的思路和方法，具有重要的理论意义和潜在的临床应用价值。

1.2国内外研究现状

在国外，对于BCG的研究起步较早，涉及BCG的免疫机制、疫苗改进等多个方面。有研究深入探讨了BCG与天然结核分枝杆菌毒株H37Rv感染的区别，包括毒力相关基因区域差异、感染细胞和免疫细胞微环境不同、细菌细胞壁表面糖脂修饰差异以及对固有免疫细胞和T细胞应答的影响等，试图阐明BCG失保护的免疫机制。在DC研究方面，国外学者对DC的分化、成熟、抗原呈递功能以及在免疫应答中的作用进行了大量研究，揭示了DC在启动和调控适应性免疫应答中的关键作用机制。关于miRNA表达谱，利用高通量测序技术，国外已经全面分析了多种疾病状态下细胞或组织的miRNA表达差异，筛选出了一系列异常表达的miRNA，并通过功能实验初步验证了这些miRNA在细胞增殖、凋亡和转移等过程中的调控作用。

国内随着医疗水平的提高和科研实力的增强，对BCG、DC和miRNA的研究也逐渐增多。在BCG研究领域，国内科研团队在BCG的免疫效果评估、新型BCG疫苗的研发等方面取得了一定进展，如研究不同接种方式对BCG免疫效果的影响等。对于DC，国内学者主要聚焦于DC的体外培养、扩增以及在肿瘤免疫治疗中的应用研究，通过优化培养条件和联合治疗方案，提高DC免疫治疗的效果。在miRNA研究方面，国内在疾病相关miRNA的筛选、鉴定以及miRNA作为生物标志物和治疗靶点的研究上取得了一定成果，为疾病的早期诊断和治疗提供了新的方向。

然而，目前国内外对于BCG如何影响人外周血来源DC的miRNA表达谱的研究还相对较少，对于BCG与DC之间相互作用的分子机制以及miRNA在其中的调控作用尚未完全明确。现有研究主要集中在单一因素对DC或miRNA的影响，缺乏对BCG-DC-miRNA三者之间复杂调控网络的系统研究。这使得我们在理解BCG的免疫调节机制以及开发基于BCG的新型免疫治疗策略方面受到一定限制。因此，开展BCG对人外周血来源DC的