MicroRNA-现代专题讲座2012.pptVIP

MicroRNA及其研究进展

2RNA的分类细胞核和胞质线粒体功能

3小RNA分子本身又包含若干种RNA，根据小RNA的生成、结构和功能可分为三类：miRNA（microRNA)siRNA(shortinterferingRNA)其他小RNA

4一、miRNA定义及特征

5命名原则(1)将物种缩写置于miRNA之前，如hsa-miR-195。(2)确定命名规则之前发现的miRNA，如let-7，则保留原来名字。(3)microRNA简写成miR，再根据其被克隆的先后顺序加上阿拉伯数字，如miR-21。(4)高度同源的miRNA在数字后加上英文小写字母(a、b、c??)，如miR-199a和miR-199b。

6WhataremicroRNAs？（1）miRNA是广泛存在于真核生物中的一组短小的、不编码蛋白质的RNA家族，由19-25个核苷酸组成的单链RNA（3′端可有1-2个碱基长度变化）；miRNA表达具有组织特异性和阶段特异性。

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8WhataremicroRNAs？（2）miRNA具有高度保守性，即各种miRNA都能在其他种系中找到同源体；miRNA独有的特征：其5＇端第一个碱基对U有强烈的倾向性，而对G却有抗性，但第二到第四个碱基缺乏U，一般来讲，除第四个碱基外，其他位置碱基通常都缺乏CmiRNA执行一定的生物学功能：对与其互补的mRNA表达水平具有调节作用；一些偏大miRNA可能参与基因组的重组装（27nt）；

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10miRNA的成熟体内外实验研究表明miRNA的生成至少需要两个步骤： 1）由长的内源性转录本（pri-miRNA)生成70nt左右的miRNA前体（pre-miRNA)，该过程发生在细胞核;2)将pre-miRNA加工为成熟miRNA，该过程发生在细胞质。

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17Pre-miRNAPre-miRNA是由内源性基因间区或内含子的DNA反向重复序列转录而来,它是一种长约70nt的非编码RNA,具有茎-环结构也即发夹状结构。Pre-miRNA在Dicer的作用下可被剪切成miRNAmiRNA只是pre-miRNA茎中的一个臂

18miRNA与靶mRNA的作用模式：二者不完全互补，即二者不完全配对结合时，主要影响翻译过程而对mRNA的稳定性无任何影响。如线虫的lin-4二者完全互补，即二者完全配对结合后，类似siRNA与靶mRNA的结合，特异性的切割mRNA。如miR39/miR171两种模式均具备。当其与靶mRNA完全互补配对，直接靶向切割mRNA，而不完全互补配对时起调节基因翻译作用。如let-7果蝇/线虫

19miRNA与siRNA的作用机制：

20miRNA与siRNA的区别：miRNA产生：细胞内RNA的固有组分之一（正常）来源：内源转录本直接来源：发夹状pre-miRNA结构：单链互补性：不完全互补，存在错配现象对靶RNA特异性：相对较低，一个突变不影响miRNA的的效应途径：miRNA途径对RNA的影响：在RNA代谢的各个层面进行调控功能：调节内源基因的表达在蛋白质合成水平发挥作用，与mRNA的稳定性无关s