土壤中分解尿素细菌分离和计数.pptxVIP

土壤中分解尿素细菌分离和计数;一、课题背景;3、常见的分解尿素的微生物;1、实例：;要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；配置合适的培养基

方法：

⑴抑制大多数微生物生长

⑵造成有利于该菌生长的环境，

结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过稀释涂布平板法等方法对它进行纯化培养分离。;15.0g;;1、显微镜直接计数：;2.间接计数法（活菌计数法）

（1）常用方法：;注意事项

①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。

②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。

④涂布平板法所选择的稀释度很重要，一般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。;每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M

其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。;设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。;小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。;二.实验的具体操作

㈠.土壤取样

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。

◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

㈡.制备培养基：

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。;◆应在火焰旁称取土壤10g。

◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行;为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？;㈣.取样涂布;㈤.微生物的培养与观察;微生物的培养与观察;关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。;关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。;关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。;三.结???分析与评价

1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。

2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。;四、操作提示;五.课外延伸

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。;伊红—美蓝培养基是鉴别培养基，可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标，因为的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈深紫色并带有金属光泽，使大肠杆菌的菌落显示出来，并没有促进大肠杆菌的生长和抑制其他微生物的生长。;大肠杆菌呈黑色中心,有或无金属光泽;本课题知识小结:;六、例题解析;例2．在微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最显著最激烈的时期是

A．调整期B．对数期

C．稳定期D．衰亡期;1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是（）

A.在液体培养基上进行B.至少接种一种细菌

C.接种一个细菌D.及时补充消耗的营养物质

2.使用选择培养基的目的是（）

A.培养细菌

B.培养真菌

C.使需要的微生物大量繁殖

D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别

3.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()

A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3

C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素;ThankYou!