第五章植物人工繁殖.pptVIP

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(2)、外植体的选择及处理2取材母株的预处理外植体休眠期的处理外植体的消毒第29页,共84页,星期日,2025年,2月5日外植体的消毒第一,要选取植物组织内部无菌的材料从健壮的植株上取材,不要取有伤口的或有病虫的材料;晴天,最好是中午或下午取材,不要在阴雨天或露水未干时取材。第二,杀死材料表面带有的各种微生物第30页,共84页,星期日,2025年,2月5日常用消毒剂的使用及其效果第31页,共84页,星期日,2025年,2月5日常用的消毒剂漂白粉:一种常用的低毒有效的消毒剂,它是由多种成分组成的复合化合物,一般含10-20%(W/V)次氯酸钙,易吸潮散失有效氯而失效,使用浓度一般为5-10%,或其饱和溶液。取出上清夜,处理材料10-30分钟,杀菌效果好,且不易伤害组织,活性氯为佳。密封贮存,防止失效,且不能贮藏太久,特别应随配随用。第32页,共84页,星期日,2025年,2月5日次氯酸钠:用市售的安替福民配制成含2~10%的次氯酸钠,一般组织浸泡10~30分钟。它分解氯气起杀菌作用,很易洗除,对植物无害。第33页,共84页,星期日,2025年,2月5日酒精:含量为70-75%的酒精,具有较强的渗透力和杀菌力,生长组织只需浸10-30秒钟。常用作表面灭菌的第一步,因不能彻底杀菌,往往尚需用其他杀菌剂灭菌。第34页,共84页,星期日,2025年,2月5日常用的消毒剂氯化汞:一种重金属化合物,有剧毒。0.1-0.2%氯化汞是一种效果极好的杀菌剂。一般浸3-12分钟。用氯化汞消毒的材料要用无菌水反复冲洗,洗净残留的汞,否则对培养物会产生毒害作用。第35页,共84页,星期日,2025年,2月5日第36页,共84页,星期日,2025年,2月5日接种第37页,共84页,星期日,2025年,2月5日光照培养箱第38页,共84页,星期日,2025年,2月5日试管苗大规模培养第39页,共84页,星期日,2025年,2月5日愈伤组织分化不定芽第40页,共84页,星期日,2025年,2月5日炼苗和移栽当小苗生根成为完整的再生植株后,可以出瓶种植由于环境有很大的改变,首先要进行炼苗,使之适应外界环境1)开盖,保持小苗的水分供需平衡2)放置在与种植环境相一致的光、温条件下;或降低温度,增加光照3)防止菌类滋生一般采用三步法第41页,共84页,星期日,2025年,2月5日第42页,共84页,星期日,2025年,2月5日金线兰移栽一周的植株第43页,共84页,星期日,2025年,2月5日3、植物细胞分化与脱分化1在发育过程中,具有全能性的细胞(如受精卵细胞)逐步转变成形态、结构、功能各异的组织细胞的过程,称细胞分化(celldifferentiation)机体发育的过程,实际上就是一个细胞分化的过程第44页,共84页,星期日,2025年,2月5日植物细胞分化与脱分化2已经分化的细胞,在一定的条件下,重新回复到原始的未分化状态,称去分化或脱分化(dedifferentiation)愈伤组织(callus):愈伤组织是由外植体组织增生的细胞产生的一团不定型的疏散排列的薄壁细胞。去分化的细胞,在一定的条件下,又重新分化成各种特异性的组织细胞的过程,称再分化(redifferentiation)第45页,共84页,星期日,2025年,2月5日4、植物组织培养再生植株的途径再生植株的途径器官发生途径体细胞胚发生途径第46页,共84页,星期日,2025年,2月5日器官发生途径1器官发生(organogenesis):组织和细胞培养物形成的愈伤组织分化形成芽或根的过程。外植体(explant):用于离体无菌培养的离体材料称为外植体,可以是器官、组织、细胞和原生质体等。用于继代培养的组织培养物切段也可称为外植体。第47页,共84页,星期日,2025年,2月5日器官发生途径2外植体——愈伤组织——植株:启动期愈伤组织诱导与继代培养拟分生组织的形成器官原基和器官的形成器官形成有三种方式先发芽后生根先生根后发芽同时生根发芽第48页,共84页,星期日,2025年,2月5日体细胞胚发生途径体细胞胚(somaticembryo):又叫胚状体,指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。体细胞胚发生途径:器官外植体直接发生途径悬浮培养细胞发生途径愈伤组织发生途径单细胞发生途径:主要指小孢子或大孢子原生质体发生途径第49页,共84页,星期日,2025年,2月5日器官发生与胚状体发生的区别第50页,共84页,星期日,2025年,2月5日5、植物组织培养的问题分析玻

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