DNA高级结构、理化性质及应用.pptVIP

一、DNA的双螺旋结构及其意义;1953年，Watson和Crick发现了DNA双螺旋（doublehelix)结构模型。;DNA双螺旋结构要点：

(Watson和Crick，1953)

DNA由两条反相平行的脱氧核苷酸链组成，脱氧核糖-磷酸骨架位于双链的外侧，碱基位于内侧，双链的碱基之间以氢键相结合。

（碱基互补配对形式：A?T；G?C)

2.DNA是右手螺旋结构，螺旋直径为2nm，螺距为3.4nm。碱基平面垂直螺旋轴，相邻碱基平面距离为0.34nm，螺旋一圈包含10对碱基。

3.氢键维持DNA双链横向稳定性，碱基堆积力维持双链纵向稳定性。;图1-8DNA双螺旋结构示意图;;上述Watson和Crick的DNA双螺旋结构称为B型结构，是DNA分子在生理条件下最稳定的结构，如果改变溶液的离子强度或相对湿度，DNA螺旋结构的上述特征就会发生变化。;右手螺旋，

11碱基/螺旋;DNA双螺旋结构不同构型的意义并不在于其螺旋直径及其高度的变化，关键是由于这些变化而引起的表面结构的改变，进而影响其生物学功能。

DNA双螺旋的这种表面结构有助于DNA结合蛋白识别并结合特定的DNA序列。而这种表面构型的变化对基因组DNA与其DNA结合蛋白的特异性相互作用具有重要的意义。

;二、其它类型的DNA高级结构;1、三股螺旋DNA;;三链中碱基配对符合Hoogsteen模型：

在Py-Pu-Py型中为：T=A=T、C+=G=C（与G形成Hoogsteen键的C必须质子化）；

在Pu-Pu-Py中为：G=G=C、A=A=T;当DNA双链中含有H-回文序列时，即某区段DNA两条链分别为Hpu和Hpy，并且各自为回文结构时，任一条回文结构的5’和3’部分都可以形成分子内三股螺旋及剩余的半条回文游离单链。

在一定条件下，含回文序列DNA还可形成小瘤DNA（noduleDNA),它在中性溶液中稳定。;真核生物基因组中存在大量可形成三链DNA的多聚嘌呤核苷酸和多聚嘧啶核苷酸序列。这些序列有的存在于调控区，有的位于DNA复制的起点或终点，有的则位于染色体重组位点，提示它们可能与基因的表达调控、DNA的复制及染色体的重组有关。;2、十字型结构;5’TCCGGCAAACAAACCACCGCTGGTAGCGGTGGTTTTTTTGTTTGC

AGGCCGTTTGTTTGTGGGCGACCATCGCCACCAAAAAAACAAACG5’;与DNA双螺旋结构相比,十字形结构中氢键形成减少,而且失去了双螺旋DNA碱基堆积力的相互作用,因而稳定性不如??螺旋DNA.

十字形结构可能在基因表达调控中起作用,但其确切的生物学功能有待研究.;3.DNA的超螺旋结构;;;;(2);核小体;第一层次折叠，体积减少6倍。;超螺旋可能有两方面的生物学意义:

超螺旋DNA比松驰型DNA更紧密,使DNA分子体积变得更小,对其在细胞的包装过程更为有利;

超螺旋能影响双螺旋的解链程序,因而影响DNA分子与其他分子(如酶、蛋白质）之间的相互作用。;三、DNA的理化性质及应用;(一);;;(二);;在DNA解链过程中，由于更多的共轭双键得以暴露，DNA在紫外区260nm处的吸光值增加，并与解链程度有一定的比例关系，这种关系称为DNA的增色效应。;;;;(三);;四、核酸分子杂交的应用;;总RNA;2、滤膜杂交：;3、原位杂交(insituhybridization)：;4、DNA芯片(DNAchips)：;在特定的固相支持物表面(常用计算机硅芯片)原位合成寡核苷酸,或者将预先制备的DNA片段以显微打印的方式有顺序地固化于支持物表面;谢谢大家！