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摘要
miRNA是一类长约18~22个核苷酸的非编码小分子RNA,在癌症筛查和预
后判断方面潜力巨大。但是miRNA的同源性很高,体内表达量不高,为miRNA
的检测带来许多困难。且现在常用的miRNA检测方法一般都需要复杂的预处理
步骤、昂贵的光学仪器以及荧光试剂。电化学传感技术因具有灵敏度高、简单便
携的优点,在临床诊断、药物分析等方面被高度重视。多孔材料由于其具有的大
的比表面积、高透过性和高吸附性,被广泛应用在催化、吸附和分离等多个领域。
本文旨在以酵母细胞为模板,采用生物矿化自组装合成技术,绿色仿生合成了多
种酵母介孔材料,并作为电极传感活性材料,组装电化学传感电极,对癌症特征
的miRNA进行电化学传感检测,不需要进行扩增和链反应,不需要使用荧光试
剂,为纳米材料技术在生物医学领域的应用提供新思路。本论文的主要内容主要
包括以下几个方面:
1.我们利用酵母细胞为模板结构导向剂,仿生制备了酵母介孔铬和酵母介
孔铬钛,研究了不同合成条件(培养基成分、离子浓度、培养时间、水解促进剂
种类等)下对材料电化学传感性能的影响,筛选出最佳制备条件。此外,由于
n-p异质结的存在,酵母介孔铬钛的电化学传感性能要优于酵母介孔铬的电化学
传感性能。酵母介孔铬钛电极在检测50~150nM/L的miR-1290具有线性,其
检测限为29pM/L。
2.以上述选出的最佳制备条件合成制备了酵母介孔铁和酵母介孔铁钛,并
对酵母介孔铁钛的合成机理进行了研究。电化学测试表明,由于Ti4+取代了Fe3+,
形成了大量氧空位,酵母介孔铁钛的电化学传感性能要优于酵母介孔铁的电化学
传感性能。
3.以上述选出的最佳制备条件合成制备了酵母介孔钛和酵母介孔钛硅,对
miRNA完美匹配和错配溶液进行了电化学研究。结果表明,电化学检测仅在检
测miRNA完美匹配溶液时出现氧化峰,而所有错配溶液均未检测到氧化峰,该
传感检测技术可用于miRNA的特异性检测。通过修饰酵母介孔材料,可有利于
miRNAs在低电位的检测,并避免高电位对电极的破坏,延长电极使用寿命。
关键词:酵母模板;介孔材料;癌症;miRNA;电化学检测
ABSTRACT
MicroRNAs(miRNAs)areakindofnoncodingsmallRNAwithabout18~22
nucleotides,whichhavegreatpotentialincancerscreeningandprognosisjudgment.
However,maturemiRNAsareveryshort,withhighhomologyandlowexpression,
whichbringmanydifficultiesformiRNAsdetection.Thecurrentwidelyused
standardmethodsformiRNAanalysisgenerallyneedcomplexpretreatmentsteps,
expensiveopticalinstrumentsandfluorescentreagents.Electrochemicalsensing
technologyishighvaluedinclinicaldiagnosisanddruganalysisduetoitshigh
sensitivity,simplicityandportability.Besides,porousmaterialshavebeenwidely
usedincatalysis,adsorptionandseparationfortheirlargespecificsurfacearea,high
permeabilityandhighadsorption.Inthispaper,wefocusonthesynthesisofavariety
ofyeastmesoporousmaterials
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