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2025年大学《医学实验技术-分子与细胞实验操作实训》考试备考题库及答案解析

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一、选择题

1.在进行PCR实验时，以下哪项是错误的（）

A.模板DNA的浓度会影响PCR扩增效率

B.引物二聚体的形成会降低PCR特异性

C.dNTPs的缺失会导致PCR无法进行

D.退火温度过高会抑制PCR反应

答案：C

解析：PCR实验需要四种dNTPs（dATP、dGTP、dCTP、dTTP）作为合成新链的原料，如果dNTPs缺失，PCR反应将无法进行。模板DNA浓度、引物二聚体形成和退火温度都会影响PCR的特异性和效率，但它们本身并不会导致PCR完全无法进行。

2.以下哪种方法最适合用于分离纯化蛋白质（）

A.凝胶过滤层析

B.离子交换层析

C.凝胶电泳

D.亲和层析

答案：A

解析：凝胶过滤层析（也称为尺寸排阻层析）是根据分子大小不同进行分离纯化的方法，非常适合用于分离纯化蛋白质。离子交换层析是根据蛋白质表面电荷不同进行分离，亲和层析利用特定配体与目标蛋白质的结合进行分离，凝胶电泳主要用于蛋白质的鉴定和分子量测定，而不是分离纯化。

3.在细胞培养过程中，以下哪项操作是错误的（）

A.使用无菌的细胞培养皿和试剂

B.在超净工作台中操作

C.定期更换细胞培养液

D.将细胞置于强光照环境中

答案：D

解析：细胞培养需要在无菌条件下进行，使用无菌的细胞培养皿和试剂，并在超净工作台中操作，以防止污染。细胞培养液需要定期更换，以提供新鲜的营养物质并去除代谢废物。细胞对光照敏感，强光照会损害细胞，应将其置于避光环境中培养。

4.以下哪种试剂常用于细胞固定（）

A.乙醇

B.TritonX-100

C.PBS

D.DAPI

答案：A

解析：细胞固定是指使用化学试剂使细胞结构稳定，常用的固定剂有乙醇、甲醇、甲醛等。TritonX-100是细胞通透剂，PBS是磷酸盐缓冲液，DAPI是荧光染料，用于染色细胞核。

5.在进行WesternBlot实验时，以下哪项步骤是错误的（）

A.将蛋白质转移到聚丙烯酰胺凝胶上

B.用特异性抗体进行孵育

C.用辣根过氧化物酶标记的二抗进行孵育

D.使用化学发光剂检测条带

答案：A

解析：WesternBlot实验是将蛋白质转移到聚偏氟乙烯（PVDF）膜或硝酸纤维素膜上，而不是聚丙烯酰胺凝胶上。蛋白质转移到膜上后，用特异性抗体进行孵育，然后用辣根过氧化物酶标记的二抗进行孵育，最后使用化学发光剂或荧光底物检测条带。

6.以下哪种方法常用于检测基因表达（）

A.RT-PCR

B.RFLP分析

C.DNA测序

D.等电聚焦

答案：A

解析：RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）是将RNA逆转录为cDNA，然后进行PCR扩增，常用于检测基因表达水平。RFLP分析（限制性片段长度多态性分析）是利用限制性内切酶识别和切割DNA片段，用于基因分型。DNA测序是测定DNA序列的方法。等电聚焦是根据蛋白质等电点不同进行分离的方法。

7.在进行酶联免疫吸附实验（ELISA）时，以下哪项步骤是错误的（）

A.将抗原包被在微孔板上

B.用酶标记的二抗进行孵育

C.加入底物溶液进行显色

D.用荧光显微镜观察结果

答案：D

解析：ELISA实验是将抗原或抗体包被在微孔板上，然后用特异性抗体或抗原进行孵育，接着用酶标记的二抗或一抗进行孵育，最后加入底物溶液进行显色。结果可以通过酶标仪进行定量检测，而不是用荧光显微镜观察。

8.以下哪种试剂常用于核酸杂交（）

A.SDS

B.SDS

C.形成交叉双链的核酸探针

D.聚乙二醇

答案：C

解析：核酸杂交是指单链核酸分子间形成双链的过程，常使用核酸探针（一段已知序列的单链核酸）与目标核酸进行杂交。SDS（十二烷基硫酸钠）是去污剂，SDS是聚丙烯酰胺凝胶电泳，聚乙二醇是浓缩剂，这些试剂不直接参与核酸杂交。

9.在进行流式细胞术实验时，以下哪项操作是错误的（）

A.将细胞制成单细胞悬液

B.用荧光染料标记细胞

C.将细胞样品加入流式细胞仪的样品管中

D.用显微镜观察细胞

答案：D

解析：流式细胞术实验需要将细胞制成单细胞悬液，并用荧光染料标记细胞，然后将细胞样品加入流式细胞仪的样品管中。流式细胞仪会逐个检测细胞的光学信号，而不是用显微镜观察细胞。

10.以下哪种方法常用于构建基因表达载体（）

A.限制性内切酶消化和连接

B.凝胶电泳

C.PCR扩增

D.DNA测序

答案：A

解析：构建基因表达载体需要使用限制性内切酶消化外源基因和载体DNA，然后通过DNA连接酶将它们连接起来。凝胶电泳用于分离和鉴定DNA片段。PCR