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宠物分子生物学基础知识面试题中级

一、选择题（共5题，每题2分，合计10分）

注：请选择最符合题意的选项。

1.在宠物基因检测中，PCR（聚合酶链式反应）技术的主要作用是？

A.纯化基因组DNA

B.扩增特定DNA片段

C.替代基因测序

D.检测RNA表达水平

2.以下哪种分子标记技术常用于犬类品种鉴定？

A.RFLP（限制性片段长度多态性）

B.SNP（单核苷酸多态性）

C.AFLP（扩增片段长度多态性）

D.RAPD（随机扩增多态性DNA）

3.在宠物遗传病诊断中，全外显子组测序（WES）主要针对哪些序列进行测序？

A.基因组全部区域

B.蛋白编码区（外显子）

C.基因组非编码区

D.线粒体基因组

4.宠物DNA提取过程中，裂解细胞的主要目的是？

A.提高DNA纯度

B.降解RNA

C.释放基因组DNA

D.增强酶活性

5.在宠物基因编辑中，CRISPR/Cas9系统的主要组件包括？

A.Cas9蛋白和gRNA

B.TALEN和CRISPRRNA

C.ZFN和sgRNA

D.LCR和miRNA

二、填空题（共5题，每题2分，合计10分）

注：请根据题意填写正确答案。

1.PCR反应体系中，引物通常需要设计成______碱基对，以特异性结合目标序列。

2.宠物线粒体DNA（mtDNA）通常编码______种蛋白质。

3.基因芯片技术常用于______的检测，可同时分析大量基因表达。

4.基因组重测序（WGS）的主要目的是获取______的基因组信息。

5.在宠物遗传咨询中，连锁分析常用于______的疾病筛查。

三、简答题（共4题，每题5分，合计20分）

注：请简要回答问题，字数控制在150-200字。

1.简述PCR技术的原理及其在宠物遗传检测中的应用场景。

2.解释SNP分子标记在宠物品种鉴定中的优势。

3.描述宠物DNA提取的基本步骤及其关键注意事项。

4.比较全基因组测序（WGS）与全外显子组测序（WES）的优缺点。

四、论述题（共2题，每题10分，合计20分）

注：请结合实际案例或应用场景，详细阐述。

1.试述CRISPR/Cas9技术在宠物遗传病模型构建中的应用及其伦理考量。

2.结合中国宠物市场现状，分析分子生物学技术在宠物疾病诊断与预防中的发展趋势。

答案与解析

一、选择题答案与解析

1.B

解析：PCR技术通过特异性引物扩增目标DNA片段，是基因检测中最常用的分子方法。其他选项描述的技术或应用均不准确。

2.B

解析：SNP分子标记因位点数量丰富、检测便捷，已成为犬类品种鉴定的主流技术。其他选项虽可用于遗传分析，但SNP在犬类研究中更具优势。

3.B

解析：WES仅测序蛋白编码区（外显子），约占总基因组的1-2%，但包含90%以上的致病突变位点，适合遗传病诊断。

4.C

解析：DNA提取的核心步骤是通过裂解细胞壁和细胞膜释放基因组DNA。其他选项描述的是后续纯化或降解过程。

5.A

解析：CRISPR/Cas9系统由Cas9蛋白（切割酶）和gRNA（导向RNA）组成，通过gRNA识别目标序列，Cas9进行切割。其他选项是其他基因编辑系统的组件。

二、填空题答案与解析

1.18-20

解析：引物长度通常为18-20碱基对，以保证特异性结合且避免非特异性扩增。

2.37

解析：犬类线粒体DNA编码13种蛋白质，参与能量代谢。

3.基因表达谱

解析：基因芯片可同时检测数千个基因的表达水平，用于疾病诊断或药物研发。

4.全基因组

解析：WGS测序整个基因组，提供最全面的信息，但成本较高。

5.单基因遗传病

解析：连锁分析通过家族遗传图谱定位致病基因，适用于孟德尔遗传病筛查。

三、简答题答案与解析

1.PCR技术原理及应用

解析：PCR通过变性-退火-延伸循环，在体外扩增特定DNA片段。在宠物检测中，可用于遗传病（如猫糖尿病的M6P/CD2AP基因）、亲子鉴定（如SRY基因检测）及病原体检测（如犬瘟热病毒）。

2.SNP分子标记优势

解析：SNP位点稳定、数量丰富，可通过芯片或测序快速分析，适用于犬种鉴定（如BCR1位点区分藏獒与蒙古犬）、群体遗传学研究及药物基因组学。

3.DNA提取步骤与注意事项

解析：基本步骤包括细胞裂解（如使用裂解缓冲液）、蛋白酶K消化RNA、酚氯仿抽提、乙醇沉淀。关键点：避免反复冻融，防止DNA降解；选择合适的裂解方法（如血液用试剂盒，组织需加EDTA抑制DNase）。

4.WGS与WES对比

解析：WGS提供完整基因组信息，适用于未知突变检测，但成本高、数据量大；WES聚焦外显子，成本较低，但可能遗