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平板划线接种法的应用;;
划线接种培养结果作为培养基是否达到质量控制标准要求的依据。;将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜作为工作菌悬液;1μL接种环;▲操作时用接种环,接种环应完全浸入培养基中。
▲取一满环接种物,将接种环接触容器边缘3次可去除多余的液体。
▲划线时,接种环与琼脂平面的角度应为20~30。
▲接种环压在琼脂表面的压力和划线速度前后一致,整个划线应快速连续
▲移取液体培养物时应将接种环伸入培养液下部分以防止环上产生气泡或泡沫。;放置36±1℃需氧培养40-48小时。
培养后观察每条线上有无菌落生长及菌落的稠密度,计算生长指数G,评价培养基的质量。;培养后对培养基计算生长指数G。每条有比较稠密菌落生长的划线则G为1,每个培养皿上最多为6分。如果仅一半的线有稠密菌落生长,则G为0.5。如果划线上没有菌落生长、生长量少于划线的一半或菌落生长微弱,则G为0。记录每个平板的得分总和便得到G。;非目标菌的生长指数G一般小于或等于1,至少应达到小于5。非目标菌的生长应该部分或全部被抑制;平板划线接种应用二;通常情况下要用同一个接种环对A区~D区进行划线,在不同区城划线时不对按种环的灼烧灭菌。在某些特殊情况下,当期望得到较低的生长指数G有明显区别时,在A区和B区接种时应更换接种环或对其进行灼烧灭菌。;◆培养后,评估菌落的形状、大小和密度,并计算生长指数G1。每条有菌落生长的划线记作1分,每个培养皿上最多为16分。
◆如果仅一半的线有菌落生长,记作0.5分。
◆如果划线上没有菌落生长或生长量少于划线一半,则记作0。记录每个平板的得分总和便得到G。
◆如菌落在A区和B区全部生长,而在C区有一半线生长,则G为10。;◆目标菌株的生长指标G1大于6时,则判定培养基可接受。◆非选择性培养基的G,值通常更高。
◆目标菌应呈现典型的生长,而非目标菌的生长应部分或完全被抑制。;谢谢聆听!
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