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2025年仪器分析荧光试题及答案

一、选择题（每题2分，共20分）

1.下列关于荧光产生的描述中，错误的是（）

A.分子需吸收光能跃迁到激发态

B.激发态电子通过振动弛豫损失部分能量

C.荧光发射对应激发态S?到基态S?的辐射跃迁

D.磷光发射的寿命通常短于荧光

2.某物质在乙醇中的荧光量子产率为0.35，在二甲基亚砜（DMSO）中降至0.12，最可能的原因是（）

A.DMSO极性更大，增强了分子内电荷转移

B.DMSO黏度更高，减少了非辐射跃迁

C.DMSO与物质形成氢键，促进了系间窜越

D.DMSO作为质子溶剂，引发了荧光猝灭

3.荧光分光光度计中，激发单色器通常位于样品池（），发射单色器位于样品池（）

A.左侧；右侧

B.右侧；左侧

C.前方；后方（与激发光成90°）

D.后方；前方（与激发光成180°）

4.下列物质中，最可能具有强荧光的是（）

A.苯甲酸（苯环-COOH）

B.萘酚（萘环-OH）

C.硝基苯（苯环-NO?）

D.马来酸（非平面共轭结构）

5.温度升高时，荧光强度通常会降低，主要原因是（）

A.分子热运动加剧，非辐射跃迁概率增加

B.激发态寿命延长，能量损失更多

C.溶剂挥发导致浓度变化

D.荧光物质发生分解

6.若某荧光物质的斯托克斯位移为50nm，其激发光波长为350nm，则发射光波长约为（）

A.300nm

B.350nm

C.400nm

D.450nm

7.下列猝灭类型中，属于动态猝灭的是（）

A.激发态分子与猝灭剂碰撞失活

B.基态分子与猝灭剂形成无荧光复合物

C.荧光物质因浓度过高发生自吸收

D.溶液pH变化导致分子解离

8.荧光定量分析中，当浓度超过一定值时，校准曲线会偏离线性，主要原因是（）

A.激发光强度不足

B.荧光物质发生光分解

C.自吸效应或浓度猝灭

D.单色器分辨率下降

9.用于生物成像的近红外荧光探针（700-900nm）的主要优势是（）

A.激发光能量高，穿透深度大

B.生物组织对该波段吸收和散射少

C.探针量子产率通常高于可见光区

D.仪器检测灵敏度更高

10.某荧光物质的荧光寿命为5ns，其激发态寿命主要由（）决定

A.辐射跃迁速率常数

B.非辐射跃迁速率常数

C.辐射与非辐射跃迁速率常数之和的倒数

D.激发光脉冲宽度

二、填空题（每空1分，共20分）

1.荧光发射光谱的形状主要取决于分子的__________，与激发波长__________（填“有关”或“无关”）。

2.荧光量子产率φ的定义是__________与__________的比值。

3.常用的荧光激发光源有__________和__________（各举一例）。

4.分子中引入给电子取代基（如-OH、-NH?）通常会__________（填“增强”或“减弱”）荧光；引入吸电子取代基（如-NO?、-COOH）通常会__________（填“增强”或“减弱”）荧光。

5.荧光猝灭中，氧气作为猝灭剂主要通过__________机制起作用；碘离子（I?）作为猝灭剂主要通过__________机制起作用。

6.斯托克斯位移是指__________与__________的波长差。

7.荧光寿命的测量方法包括__________和__________（各举一种）。

8.生物样品中荧光分析常需去除背景干扰，常用方法有__________和__________（如选择合适波长、加入掩蔽剂等）。

9.当荧光物质浓度过高时，可能发生__________现象，表现为荧光强度随浓度增加而降低。

10.荧光共振能量转移（FRET）发生的条件是供体的__________与受体的__________有重叠。

三、简答题（每题8分，共40分）

1.简述荧光与磷光的主要区别（至少4点）。

2.列举影响荧光强度的主要因素，并分别说明其作用机制。

3.荧光分光光度计与紫外-可见分光光度计在结构上的主要差异有哪些？

4.为什么荧光定量分析通常要求样品浓度较低？若浓度过高可采取哪些措施改善线性？

5.设计一个实验方案，用荧光法测定某水样中的痕量铅离子（Pb2?），需说明原理、试剂选择、仪器条件及注意事项。

四、计算题（每题10分，共20分）

1.用荧光法测定维生素B?（核黄素）的含量。配制系列标准溶液，测得荧光强度如下：

标