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演讲人：日期:病理科淋巴瘤病理诊断要点

CATALOGUE目录01标本处理与制备规范02形态学诊断基础03免疫组化应用要点04分子检测技术应用05诊断报告核心要素06鉴别诊断关键环节

01标本处理与制备规范

活检类型选择要点穿刺活检与切除活检的适应症穿刺活检适用于深部淋巴结或器官病变的微创取样，而切除活检更适合浅表淋巴结或需完整评估组织结构的病例，需根据病变位置和临床需求综合选择。标本大小的权衡多部位取材的重要性活检标本应确保足够体积以涵盖病变区域，避免因样本过小导致诊断困难，同时需平衡患者创伤与诊断需求。对于疑似淋巴瘤病例，建议从不同区域（如淋巴结中心与边缘）分别取材，以提高异质性病变的检出率。123

组织固定要求及时限固定液类型与浓度推荐使用10%中性缓冲福尔马林固定液，其pH值稳定且能有效保存组织抗原性，避免酸性固定液导致的抗原降解。延迟固定的影响若标本未能及时固定，可能引发自溶或抗原丢失，需记录离体至固定的间隔时间并在报告中注明。固定时间与渗透深度组织块厚度不宜超过3mm，固定时间需保证6-48小时，过短可能导致固定不充分，过长则可能引起组织硬化影响后续染色。

切片质量与染色标准03染色均匀性与脱片预防切片需经充分脱蜡和水化，避免染色不均；使用多聚赖氨酸载玻片或烤片程序以减少脱片风险。02特殊染色与免疫组化的质量控制针对淋巴瘤诊断，CD20、CD3等抗体染色需设立阳性与阴性对照，确保染色特异性与敏感性符合标准。01切片厚度与平整度常规HE染色切片厚度应控制在3-5μm，过厚易导致细胞重叠影响观察，过薄可能丢失关键结构信息。

02形态学诊断基础

肿瘤细胞特征识别010203细胞大小与形态异质性淋巴瘤肿瘤细胞常表现为大小不一，形态多样，包括小淋巴细胞、中等大小细胞及大细胞，需结合核浆比、核形（圆形、不规则或分叶状）等特征综合判断。核染色质与核仁特点低级别淋巴瘤通常呈现致密块状染色质，核仁不明显；高级别淋巴瘤则常见空泡状染色质和显著核仁，如弥漫大B细胞淋巴瘤中可见多个嗜碱性核仁。胞浆特征与特殊结构部分淋巴瘤胞浆丰富且嗜碱性（如浆母细胞淋巴瘤），或含空泡（如Burkitt淋巴瘤），偶见胞浆内包涵体（如MALT淋巴瘤中的淋巴上皮病变）。

组织结构模式分析弥漫性生长模式常见于侵袭性淋巴瘤（如弥漫大B细胞淋巴瘤），肿瘤细胞弥漫浸润，破坏正常淋巴结或组织架构，需与反应性增生鉴别。结节性/滤泡性模式滤泡性淋巴瘤表现为肿瘤性滤泡结构，滤泡大小形状相似、缺乏套区或极性消失，需结合免疫组化确认单克隆性。血管中心性浸润血管内大B细胞淋巴瘤或结外NK/T细胞淋巴瘤可显示肿瘤细胞围绕血管生长，伴血管壁浸润或坏死，提示高度侵袭性。

炎性细胞浸润淋巴瘤周围常见反应性T细胞、组织细胞或嗜酸性粒细胞浸润，如霍奇金淋巴瘤中的背景炎症需与感染性或自身免疫性疾病鉴别。背景反应性成分评估纤维化与间质改变部分淋巴瘤（如结节硬化型霍奇金淋巴瘤）伴显著胶原纤维分割，或间质硬化（如原发性纵隔大B细胞淋巴瘤），需注意与转移癌或肉瘤区分。坏死与凋亡现象高级别淋巴瘤（如Burkitt淋巴瘤）常见“星空现象”（巨噬细胞吞噬凋亡碎片），而广泛坏死可能提示血管受累或治疗相关改变。

03免疫组化应用要点

CD20与CD3联合检测CD20是B细胞标志物，CD3是T细胞标志物，两者联合可区分B细胞和T细胞淋巴瘤，为后续分型提供基础依据。CD45（LCA）泛白细胞标记用于确认病变细胞的造血系统来源，排除非造血系统肿瘤如癌或肉瘤的干扰。Ki-67增殖指数检测评估肿瘤细胞的增殖活性，对判断淋巴瘤的侵袭性和预后具有重要参考价值。BCL-2与BCL-6组合BCL-2过表达常见于滤泡性淋巴瘤，BCL-6与生发中心来源相关，两者结合可辅助鉴别滤泡性淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤。基础抗体套餐选择

特殊亚型标记组合需包含CyclinD1（核阳性）与SOX11（核阳性），结合CD5（膜阳性）和CD23（阴性）可明确诊断。套细胞淋巴瘤套餐重点检测CD10（阳性）、BCL-2（阴性）、BCL-6（阳性）及Ki-67（近100%阳性），需结合MYC基因重排检测。典型组合为CD30（阳性）、CD15（阳性）、PAX5（弱阳性）及CD45（阴性），需注意背景反应性B细胞的干扰。伯基特淋巴瘤套餐必须包含CD30（膜和高尔基区阳性）和ALK（核/浆阳性），辅以EMA（常阳性）和T细胞标记（CD2/CD4/CD5等）。间变性大细胞淋巴瘤套奇金淋巴瘤套餐

染色结果判读标准将染色强度分为0（阴性）、1+（弱阳性）、2+（中等阳性）、3+（强阳性），其中2+及以上具有诊断意义。阳性强度分级标准需区分肿瘤细胞特异性染色与坏死区域假阳性、组织边缘人为着色或内源性生物素干扰造成的假阳性。背景染色干扰排除膜标记（如CD