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核桃外果皮棕色素：多维度提取工艺与抗氧化性能深度剖析

一、引言

1.1研究背景

核桃（JuglansregiaL.）作为一种广泛种植的坚果类植物，在全球范围内具有重要的经济价值。除了其富含营养的核仁被大量食用外，核桃外果皮中也蕴含着丰富的生物活性物质。核桃外果皮棕色素作为其中一种重要的成分，属于天然色素的范畴。

在当今社会，随着人们健康意识的不断提高，对天然、安全、健康的食品和日用品的需求日益增长。天然色素相较于合成色素，具有更高的安全性和生物活性，逐渐成为食品、化妆品、药品等领域的研究热点。核桃外果皮棕色素作为一种潜在的天然色素资源，具有良好的抗氧化性能，在食品保鲜和功能性食品开发方面具有巨大的应用潜力。同时，将核桃外果皮中的棕色素进行有效提取和利用，不仅可以提高核桃的综合利用率，减少资源浪费，还能为相关产业提供新的原料来源，创造更多的经济效益和社会效益。因此，深入研究核桃外果皮棕色素的提取及抗氧化性能具有重要的理论和实际意义。

1.2国内外研究现状

在提取方法研究方面，国内外学者已探索出多种用于核桃外果皮棕色素提取的方法。超声波萃取法是目前应用较广的一种方法，其原理是利用超声波的空化作用和机械振动，使固体颗粒与液体混合物产生振动与干扰，改变其表面能力，从而使活性物质易于从样品中释放出来。有研究表明，利用2小时超声波处理对核桃外果皮进行萃取可以得到收率为35％的棕色素。微波辅助萃取法利用微波能量对样品产生加热作用，从而促进萃取。该方法能够快速提高萃取速度和提取率，且能够保持物质的活性和稳定性，研究发现用40%乙醇进行微波辅助萃取核桃外果皮中的棕色素时，能够获得较高的提取率。超临界萃取法是一种操作简单、节能环保、提取效率高的萃取方法，通过改变溶剂的温度和压力，使其处于超临界状态，从而提高溶剂的渗透力和萃取效率。以二氧化碳为萃取溶剂的超临界萃取法，可以高效地萃取核桃外果皮中的棕色素，在80℃温度、25MPa压力下超临界萃取法获得的棕色素提取率最高。此外，还有溶剂回流提取法、纤维素酶提取法等也被应用于核桃外果皮棕色素的提取研究中。

在抗氧化性能研究方面，大量研究表明核桃外果皮棕色素具有较强的抗氧化性能，主要表现为清除自由基、抑制氧化酶、捕捉活性氧等。研究表明，核桃外果皮中的棕色素能够有效清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基，并能够抑制体内氧化酶的活性。棕色素还可作为一种天然抗氧化剂，能够防止高脂血症、心脏疾病、癌症等多种慢性疾病的发生。

然而，当前研究仍存在一些不足与空白。在提取工艺方面，虽然已开发多种提取方法，但各方法在实际应用中仍存在成本高、设备复杂、提取率有待进一步提高等问题，且不同提取方法对棕色素结构和活性的影响研究还不够深入。在抗氧化性能研究方面，对于核桃外果皮棕色素抗氧化的具体作用机制，以及其在复杂体系中的抗氧化稳定性等方面的研究还相对较少。

1.3研究目的与内容

本研究旨在通过对核桃外果皮棕色素提取工艺的优化，提高棕色素的提取率和纯度，并深入探究其抗氧化性能，为核桃外果皮棕色素的开发利用提供理论依据和技术支持。

具体研究内容包括：首先，系统研究不同提取方法（如超声波萃取法、微波辅助萃取法、超临界萃取法等）对核桃外果皮棕色素提取率和纯度的影响，通过单因素实验和正交实验，优化提取工艺参数，确定最佳提取工艺条件。其次，采用多种体外抗氧化模型（如DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力等），全面评价核桃外果皮棕色素的抗氧化性能，并与常见的抗氧化剂（如维生素C、维生素E等）进行对比分析。最后，初步探讨核桃外果皮棕色素的抗氧化作用机制，为其在食品、化妆品、药品等领域的应用提供理论基础。

二、核桃外果皮棕色素提取工艺研究

2.1材料与仪器准备

原料：新鲜核桃外果皮，采自[具体产地]，采摘后迅速运回实验室，去除杂质，洗净，自然晾干，粉碎后过40目筛，密封保存备用。

试剂：无水乙醇、95%乙醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、氢氧化钠、盐酸、纤维素酶、果胶酶、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（ABTS）、硫酸亚铁、过氧化氢、水杨酸等，均为分析纯。

仪器：电子天平（精度0.0001g）、高速万能粉碎机、恒温磁力搅拌器、恒温水浴锅、旋转蒸发仪、真空干燥箱、紫外可见分光光度计、超声波清洗器、离心机、pH计等。

2.2去除叶绿素工艺

核桃外果皮中除了含有棕色素外，还含有一定量的叶绿素，叶绿素的存在会影响棕色素的纯度和色泽，因此在提取棕色素前需要去除叶绿素。本研究采用有机溶剂萃取法去除叶绿素，具体方法如下：取一定量