林木转基因 CRISPR 碱基编辑产物纯化检测试题库及答案.docVIP

林木转基因CRISPR碱基编辑产物纯化检测试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.CRISPR系统中，识别靶序列的是（）

A.Cas蛋白B.gRNAC.tracrRNAD.以上都不是

2.碱基编辑技术可实现（）的精准替换。

A.氨基酸B.碱基C.蛋白质D.基因

3.纯化检测时常用的蛋白分离方法是（）

A.离心B.过滤C.凝胶过滤层析D.透析

4.检测碱基编辑产物是否成功的常用技术是（）

A.荧光定量PCRB.测序C.蛋白质印迹D.酶活性检测

5.以下哪种酶在碱基编辑中起关键作用（）

A.限制性内切酶B.连接酶C.脱氨酶D.激酶

6.进行产物纯化时，去除小分子杂质常用（）

A.离子交换层析B.超滤C.亲和层析D.疏水层析

7.确定碱基编辑产物的分子量常用（）

A.密度梯度离心B.SDSC.等密度离心D.等速离心

8.用于扩增碱基编辑产物相关基因的技术是（）

A.RT-PCRB.PCRC.qPCRD.LAMP

9.碱基编辑技术的优势不包括（）

A.精准性高B.操作简单C.随机突变D.效率较高

10.对碱基编辑产物进行定量分析可采用（）

A.紫外分光光度法B.比色法C.ELISAD.以上都可

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.以下属于CRISPR系统组成部分的有（）

A.Cas蛋白B.gRNAC.tracrRNAD.启动子

2.碱基编辑可能带来的变化有（）

A.基因序列改变B.蛋白质结构改变C.生物功能改变D.细胞形态改变

3.纯化碱基编辑产物的方法有（）

A.亲和层析B.离子交换层析C.凝胶过滤层析D.超滤

4.检测碱基编辑产物的技术手段有（）

A.测序B.荧光定量PCRC.蛋白质电泳D.酶切分析

5.影响碱基编辑效率的因素包括（）

A.gRNA设计B.Cas蛋白活性C.细胞类型D.培养条件

6.以下关于CRISPR碱基编辑技术特点描述正确的是（）

A.可定点编辑B.可同时编辑多个位点C.脱靶效应低D.不受物种限制

7.在林木转基因中应用碱基编辑技术的意义有（）

A.改良性状B.加速育种进程C.创造新种质D.降低成本

8.进行产物纯化检测前的准备工作包括（）

A.样本收集B.试剂配制C.仪器校准D.人员培训

9.蛋白质印迹技术可用于检测碱基编辑产物的（）

A.表达量B.分子量C.等电点D.修饰情况

10.验证碱基编辑产物功能的方法有（）

A.基因功能互补实验B.表型观察C.生理指标测定D.转录组分析

三、判断题（每题2分，共10题）

1.CRISPR系统只能用于碱基编辑。（）

2.碱基编辑技术不会产生脱靶效应。（）

3.凝胶过滤层析是根据蛋白质电荷性质分离。（）

4.测序是确定碱基编辑产物序列的唯一方法。（）

5.所有细胞对碱基编辑技术的接受程度相同。（）

6.亲和层析纯化产物特异性高。（）

7.荧光定量PCR能直接确定碱基编辑产物的碱基变化。（）

8.碱基编辑可随意改变任何基因序列。（）

9.超滤可以去除蛋白质溶液中的所有杂质。（）

10.检测碱基编辑产物不需要进行质量控制。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述CRISPR碱基编辑技术的基本原理。

答：CRISPR系统中，gRNA引导Cas蛋白识别并结合靶位点，在脱氨酶等作用下对特定碱基进行修饰，实现碱基精准替换，从而改变基因序列。

2.列举两种常用的纯化碱基编辑产物的方法及原理。

答：亲和层析，利用蛋白质与配体特异性结合；凝胶过滤层析，依据分子大小不同，大分子先流出，小分子后流出。

3.简述检测碱基编辑产物是否成功的主要技术及作用。

答：测序可确定碱基序列是否改变；荧光定量PCR检测编辑产物基因表达量变化；蛋白质电泳分析产物分子量和表达情况。

4.简述在林木转基因中应用碱基编辑技术的优势。

答：能精准改变目标基因，改良特定性状；加速育种进程，缩短育种周期；可创造新的遗传变异，丰富林木种质资源。

五、讨论题（每题5分，共4题）

1.讨论如何进一步提高CRISPR碱基编