第四节 基因重组和杂交育种.pptVIP

第1页，共23页，星期日，2025年，2月5日一、原核生物的基因重组原核生物的基因重组形式很多：转化、转导、接合、原生质体融合。第2页，共23页，星期日，2025年，2月5日（一）转化受体菌直接吸收供体菌的DNA片段并把它整合到自己的基因组中，而获得供体菌部分遗传性状的现象，称为转化通过转化方式而形成的杂种后代，称转化子不需两个细胞直接接触，供体DNA提取出来，注入受体即可。1．定义：2转化的特点：第3页，共23页，星期日，2025年，2月5日指受体细胞最易接受外源DNA片段并能实现转化的一种生理状态。3.转化过程

能进行转化的细胞必须是感受态细胞

可人为利用环腺苷酸（cAMP）及Ca2+等提高感受态水平，环腺苷酸可提高1000倍、Ca2+能促使细胞进入感受态。一般微生物的感受态出现在生长的指数期后期，有的出现在指数期末和稳定期感受态：第4页，共23页，星期日，2025年，2月5日肺炎链球菌转化过程第5页，共23页，星期日，2025年，2月5日转导的种类通过缺陷噬菌体为媒介，把供体细胞的小片段DNA携带到受体细胞中，通过交换与整合，使后者获得前者部分遗传性状的现象，称为转导。(二)转导普遍转导局限转导由转导作用而获得部分新性状的重组细胞，称为转导子第6页，共23页，星期日，2025年，2月5日转导的特点需要噬菌体做媒介，不需要细胞间直接接触。噬菌体可以转导供体染色体的任何部分到受体细胞中。噬菌体总是携带同样的片段到受体细胞中。普遍性转导局限性转导第7页，共23页，星期日，2025年，2月5日(三)接合(conjugation)供体菌（F+）通过性菌毛与受体菌（F-）直接接触，把F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者，并使其获得若干新遗传性状的现象。通过接合而获得新遗传性状的受体细胞叫接合子。大肠杆菌的接合能进行接合的微生物种类主要在细菌和放线菌中进行。细菌中，尤其G-菌较为普遍。接合还可发生在不同属的一些菌种间。第8页，共23页，星期日，2025年，2月5日三者根本区别在于DNA转移的方式不同转化：供体菌DNA片断直接进入受体细胞。接合：供体菌DNA进入受体菌通过性菌毛。转导：供体菌DNA片断通过媒介－噬菌体携带进入受体菌。第9页，共23页，星期日，2025年，2月5日(四)原生质体融合

1.原生质体融合通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得具有双亲遗传性状的稳定重组子的过程，称为原生质体融合。所获得的重组子叫融合子。原生质体融合的操作示意图第10页，共23页，星期日，2025年，2月5日二、真核微生物的基因重组主要方式：有性杂交准性杂交原生质体融合转化第11页，共23页，星期日，2025年，2月5日（一）有性杂交一般指不同遗传型的两性细胞间的接合和随之发生通过减数分裂，并产生高频率基因重组并产生新遗传型后代的过程。凡是能产生有性孢子的酵母菌或霉菌，原则上都能采用与高等动、植物杂交育种相似的有性杂交方法进行育种。第12页，共23页，星期日，2025年，2月5日定义通过同一物种两个不同菌株的体细胞发生融合，不经过减数分裂而经有丝分裂导致低频率基因重组并产生重组子。存在范围：常见于一些真菌尤其是半知菌中，为半知菌育种提供了一个重要手段。（二）准性生殖第13页，共23页，星期日，2025年，2月5日Penicillumurticae的准性杂交步骤第14页，共23页，星期日，2025年，2月5日准性杂交：选择亲本：以来自不同菌株的合适的营养缺陷型为亲本强制异合：将两菌亲株的分生孢子混合涂基本培养基[-]平板，并做各单亲本对照，[-]平板上长出的菌落是异核体或杂合二倍体移单菌落：纯化菌落，并将纯化后的菌落移入[-]斜面验稳定性：在[-]夹层平板上培养后，再倒上一层完全培养基[+]，再培养后若出现大量新菌落，说明是不稳定的异核体，反之是杂合二倍体。促进变异：用诱变剂进行处理，以促进染色体发生交换、染色体在子细胞分配不均、染色体缺失或畸变、点突变等，使分离后的子代提高增加新性状的可能筛选：通过一系列生产性壮的测定。异核体：同一菌丝有不同遗传性状的核在同一细胞质中生长。同核体：同一菌丝中只有一种核。第15页，共23页，星期日，2025年，2月5日三基因工程

定义：又称重组DNA技术，指在体外将某些特定的基因或DNA片断，通过载体或其它手段送入受体细胞，使它们在受体细胞中增殖并表达，从而使生物体的遗传性状发生定向变异