水产饲料霉菌总数测定实训.pptxVIP

技能实训水产饲料霉菌总数的测定;一、技能目标

1.掌握测定水产饲料中霉菌总数的方法；

2.掌握水产饲料中霉菌检测结果的数据处理及报告方式。;二、实训器材

1.仪器设备

分析天平、恒温培养箱、干热灭菌箱、高压蒸汽灭菌器、冰箱、恒温水浴锅、振荡器、微型混合器、超净工作台、电炉等。

2.培养基

高盐察氏培养基

3.其它器材

培养皿（直径9cm）、1mL刻度吸管、玻璃珠、试管、精密pH试纸、酒精灯、三角锥瓶、灭菌广口瓶、灭菌金属刀和勺、放大镜或菌落计数器等。;三、技能操作

1.样品采集

以无菌操作取有代表性的饲料样品盛于灭菌容器内。如有包装，则用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。;2.样品检测

①以无菌操作称取检样25g(mL)，放入含225mL灭菌稀释液的三角锥形瓶中，振摇30min，即为1:10稀释液。

②用灭菌吸管吸取1:10稀释液10mL，注入带玻璃珠的灭菌试管中，另用1mL灭菌吸管反复吹吸50次，使霉菌孢子充分散开。

③取1mL混合均匀的l:10稀释液注入含有9mL灭菌稀释液的试管中。另换一支1mL灭菌吸管吹吸五次，此液为1:100稀释液。;④按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸管，根据对样品污染情况的估计，选择三个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。然后将恒温至45℃左右的高盐察氏培养基注入平皿中，并转动平皿使之与样液混匀，待琼脂凝固后，倒置于25℃～28℃恒温箱中，3d后开始观察，共培养观察5d。也可以用霉菌（酵母菌）测试片代替高盐察氏培养基接种待测样品进行培养观察。;3.菌落计数

通常选择菌落数在10～100之间的平皿进行计数，同稀释度的两个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克(或毫升)检样中所含霉菌总数。稀释度的选择和霉菌总数报告方式见表5-7。;菌落计数方法：

①选择平均菌落数在10～100之间的，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该样的霉菌总数。

②若有两个稀释度的平均菌落数均在10～100之间，则按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2，应采取两者的平均数；若大于2，则取其中较小的菌落总数。

③若所有稀释度的平均菌落数均大于100，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。

④若所有稀释度的平均菌落数小于10，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。

⑤若所有的稀释度均没有菌落生长，则以＜1乘以最低稀释倍数来报告。

⑥若所有稀释度的平均菌落数均不在10～100之间，则以最近100或10的平均菌落数乘以其对应的稀释倍数。;例次;样品种类