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2025年新冠基因检测试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30题，合计60分）

1.关于新型冠状病毒（SARS-CoV-2）基因组特征，以下描述错误的是：

A.为单股正链RNA病毒，基因组长度约29.9kb

B.包含5’端帽子结构和3’端poly(A)尾

C.主要开放阅读框（ORF）包括ORF1ab、S、E、M、N基因

D.基因组变异主要集中于N基因，S基因相对保守

答案：D（解析：SARS-CoV-2变异主要集中于刺突蛋白（S）基因，N基因相对保守。）

2.实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测新冠病毒时，若Ct值为30，提示：

A.样本中病毒载量极高，传染性强

B.病毒载量较低，可能处于感染早期或恢复期

C.Ct值超过35为阳性阈值，故该结果为阴性

D.需立即重复检测，排除污染可能

答案：B（解析：Ct值与病毒载量呈负相关，Ct值30通常对应中等偏低载量，可能为感染早期或恢复期样本；目前多数标准将Ct≤35判定为阳性。）

3.新冠病毒基因检测中，内参基因（如人RPP30）的主要作用是：

A.验证引物特异性

B.监测样本采集和处理过程中是否存在核酸损失

C.提高检测灵敏度

D.区分不同变异株

答案：B（解析：内参基因用于评估样本质量，确认核酸提取过程未丢失，避免假阴性。）

4.设计新冠病毒RT-PCR引物时，最关键的原则是：

A.引物长度需严格控制在18-22bp

B.引物应靶向病毒基因组高度保守区域

C.引物GC含量需≥60%

D.引物3’端可设计为A或T以提高特异性

答案：B（解析：靶向保守区域可避免因病毒变异导致的漏检，是引物设计的核心要求。）

5.采用恒温扩增技术（如LAMP）检测新冠病毒时，其优势在于：

A.对实验室设备要求低，适合基层快速检测

B.灵敏度显著高于RT-PCR

C.可同时检测多种变异株

D.结果判读无需专业人员

答案：A（解析：LAMP无需PCR仪，通过恒温反应即可扩增，适合现场快速检测；但灵敏度与RT-PCR相当，结果判读仍需培训。）

6.关于新冠病毒样本保存与运输，以下操作正确的是：

A.咽拭子样本采集后，可在常温下保存72小时

B.病毒保存液选择时，需优先使用含胍盐的灭活型保存液

C.运输时应使用普通快递，避免冷链导致核酸降解

D.样本管需装满保存液，防止拭子干燥

答案：B（解析：灭活型保存液（如含胍盐）可有效灭活病毒，保障操作安全；样本应4℃保存≤72小时，-20℃长期保存；需采用冷链运输，保存液体积需覆盖拭子但无需装满。）

7.某实验室检测新冠样本时，阴性对照出现扩增曲线，最可能的原因是：

A.样本核酸提取效率低

B.引物设计错误

C.实验室交叉污染

D.荧光探针降解

答案：C（解析：阴性对照扩增提示实验过程中存在污染，如扩增产物泄漏、移液器未消毒等。）

8.针对奥密克戎变异株（Omicron）的基因检测，需重点关注的突变位点是：

A.S基因的D614G突变

B.N基因的R203K/G204R突变

C.S基因的F486V、R346T、K444T突变

D.E基因的122del突变

答案：C（解析：奥密克戎变异株（如XBB.1.5、EG.5）的关键突变集中于S基因的受体结合域（RBD），如F486V、R346T等，是区分于其他变异株的特征。）

9.数字PCR（dPCR）检测新冠病毒的优势不包括：

A.绝对定量，无需标准曲线

B.对抑制物耐受性更强

C.可检测极低浓度病毒（单拷贝）

D.检测时间显著短于RT-PCR

答案：D（解析：dPCR需进行微滴生成和分区扩增，检测时间与RT-PCR相近，甚至更长；其优势在于绝对定量和高灵敏度。）

10.新冠病毒全基因组测序（WGS）的主要应用场景是：

A.大规模筛查疑似病例

B.监测病毒变异趋势，追踪传播链

C.快速诊断急性期感染

D.评估疫苗保护效力

答案：B（解析：WGS耗时较长（通常需24-48小时），不适合快速诊断，主要用于变异监测和流行病学调查。）

11.关于样本核酸提取质量控制，以下指标异常提示提取失败的是：

A.核酸浓度200ng/μL，A260/A280=1.8

B.核酸浓度5ng/μL，A260/A280=1.6

C.核酸浓度100ng/μL，A260/A230=2.0

D.核酸浓度80ng/μL，A260/A280=2.0

答案：B（解析：A260/A280比值1.