传染病实验室诊断方法.docxVIP

二、实验室诊断

（一）实验室检查

传染病的诊断具有特殊的意义，因为病原体的检出和分离培养可直接确定诊断，而免疫学检查亦可提供重要根据。对许多传染病来说，一般实验室检查对早期诊断也有很大帮助。

1、一般实验室检查

包括血液，大、小便常规检查和生化检查。

血液常规检查中以白细胞计数和分类的用途最广。白细胞总数显著增多常见于化脓性细菌感染如败血症；革兰阴性杆菌感染时白细胞总数往往升高不明显甚至减少，例如布氏菌病、伤寒及副伤寒等。病毒性感染时白细胞总数通常减少或正常，如流感、病毒性肝炎等。嗜酸粒细胞减少则常见于伤寒、流行性脑脊髓膜炎等。

尿常规检查有助于钩端螺旋体病和流行性出血热的诊断，大便常规检查有助于感染性腹泻的诊断。

生化检查有助于病毒性肝炎的诊断。

（二）病理学检查

因传染病死亡的畜禽，都有一定的病理变化。可作为诊断的依据。有些病，如猪瘟、ND、IBD、MD和猪喘气病等具有特征性病理变化，有很大的诊断价值。

（三）病原学检查

1、病原体的直接检出

许多传染病可通过显微镜或肉眼检出病原体而确诊。如勾体、链球菌病。

2、病原体分离

a.细菌、螺旋体通常可用人工培养基分离培养，如伤寒杆菌、痢疾杆菌、钩端螺旋体。B.立克次体则需要动物接种或组织培养才能分离出来，如斑疹伤寒。C.病毒分离一般需用组织培养。

用以分离病原体的检材可采自血液、尿、粪、皮疹等。采集标本时应注意病程阶段，有无应用过抗微生物药物，及标本的保存与运送。

3、分子生物学检测

利用同位素或生物素标记的分子探针可以检出特异性的病毒核酸如乙型肝炎病毒DNA，或检出特异性的毒素如大肠杆菌肠毒素。

分子生物学检测

多聚酶链反应(PCR)能把标本中的DNA分子扩增100万倍以上，用于肝炎病毒和其他病原体核酸检测，可显著提高灵敏度。

（四）免疫学检测

应用已知抗原或抗体检测血清或体液中的相应抗体或抗原，是最常用的免疫学检查方法，若能进一步鉴定其抗体是属于IgG或IgM型，对近期感染或过去发生过的感染有鉴别诊断意义。

免疫学检测还可用于判断受检者的免疫功能是否有所缺损。

1、特异性抗体检测

又称血清学检查。在传染病早期，特异性抗体在血清中往往未出现或滴度很低，而在恢复期或后期则抗体滴度有显著升高，故在急性期及恢复期双份血清检测其抗体由阴性转为阳性或滴度升高4倍以上时往往有重要的意义。过去感染过某病原体或曾接受预防接种者，再感染另一病原体时，原有抗体滴度亦可升高(回亿反应)，但双份血清抗体滴度升高常在4倍以下，可鉴别。

特异性IgM型抗体的检出有助于现存或近期感染的诊断。

特异性抗体检测方法很多：

凝集反应，常用于检测伤寒、副伤寒、布病。

沉淀反应使用可溶性抗原，进行琼脂扩散、对流免疫电泳等

补体结合反应利用常用于病毒感染的诊断。中和反应。

酶联免疫吸附测定具有灵敏度高和操作简便，设备条件要求较低的优点，易于推广应用。

免疫荧光，具有快速诊断的作用。

放射免疫测定(RIA)有灵敏度和特异性较高的优点但设备条件要求较高。

2、特异性抗原检测

病原体特异性抗原的检测有助于在病原体直接分离培养不成功的情况下提供病原体存在的直接证据。其诊断意义往往较抗体检测更为可靠。例如在乙型肝炎病毒分离培养还未成功时，乙型肝炎表面抗原的检出即可给诊断提供明确根据。

大多数用以检测抗体的方法都可用于检测抗原，其原理相同，仅方法有所改进。如反向被动血凝法检测未知抗原用以诊断乙型肝炎、FMD。又如用免疫电镜法以已知抗体检测粪便中未知抗原来诊断轮状病毒感染等。

3、免疫学检测

皮肤试验?用特异性抗原作皮内注射，通过皮肤反应了解受试者对该抗原的变态反应。

免疫球蛋白检测?血清免疫球蛋白浓度检测有助于判断体液免疫功能。降低者见于先天性免疫缺损疾患，升高者见于慢性肝炎艾滋病等。

T细胞亚群检测?用单克隆抗体检测T细胞亚群可了解各亚群的T细胞数和比例，常用于艾滋病的诊断。