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c.对氨基酸的选择(双筛效应):AARS的氨基酸结合位点上有结合位点和水解位点两个功能域,由此形成对相似氨基酸的严格筛选,降解错误装载的氨基酸。第26页,共74页,星期日,2025年,2月5日2.反密码子对密码子的准确识读核糖体控制着tRNA和mRNA之间相互作用时的空间构象,确保只有正确的反密码子和密码子的配对。第27页,共74页,星期日,2025年,2月5日3.核糖体对进入A位的aa-tRNA-EF-Tu-GTP复合体在成肽键前的最后校对。翻译调控因子(延伸因子)的作用确保只有负载正确的氨酰-tRNA才能进入核糖体的A位,形成稳定的结合。原核生物:EF-Tu(G-蛋白)真核生物:eEF-1第28页,共74页,星期日,2025年,2月5日基因表达调控机制第29页,共74页,星期日,2025年,2月5日不同水平的调控机制:转录水平转录后水平翻译水平翻译后水平第30页,共74页,星期日,2025年,2月5日转录水平基因表达调控第31页,共74页,星期日,2025年,2月5日
基本概念与原理第32页,共74页,星期日,2025年,2月5日一、基因表达的概念贮存在DNA序列中的遗传信息,经过一序列步骤表型出其生物学功能的整个生物过程。包括基因转录、翻译、蛋白质加工、组装等产生具有生物学功能的蛋白质分子的过程。*基因表达(geneexpression)第33页,共74页,星期日,2025年,2月5日维持细胞的基本代谢过程所必需的、在不同的细胞类型和细胞生长时期组成型表达的基因。管家基因(housekeepinggene):细胞分化、生物发育及生物适应环境所需要的基因。这类基因的表达表现出明显的时空特异性。奢侈基因(luxurygene):第34页,共74页,星期日,2025年,2月5日时间特异性表达:按功能需要,某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生,称之为基因表达的时间特异性(temporalspecificity)。空间特异性(组织特异性)表达:在个体生长全过程,某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现,称之为基因表达的空间特异性(spatialspecificity)。基因表达的时空特异性(temporalandspatialspecificity):第35页,共74页,星期日,2025年,2月5日操纵子(operon):一组连续排列、协调表达、功能相关的基因称为操纵子。操纵子是原核生物基因表达调控的重要组织形式。大肠杆菌乳糖操纵子:调节基因启动子操纵基因结构基因1结构基因2结构基因3第36页,共74页,星期日,2025年,2月5日是RNA聚合酶结合并启动转录的特异DNA序列,决定着转录活性大小。RNA转录起始-35区-10区TTGACATTAACTTTTACATATGATTTTACATATGTTTTGATATATAATCTGACGTACTGTN17N16N17N16N16N7N7N6N7N6AAAAAtrptRNATyrlacrecAAraBADTTGACATATAAT共有序列启动子:第37页,共74页,星期日,2025年,2月5日操纵基因:能被调控蛋白(调控基因的产物)特异性结合的一段DNA序列,常与启动子邻近或与启动子序列重叠。调控基因:编码能与操纵基因结合的调控蛋白的基因。第38页,共74页,星期日,2025年,2月5日在某些情况下,调控基因编码的调控蛋白(阻遏蛋白)与操纵基因结合,阻止RNA聚合酶与启动子的结合或移动,影响由调控基因控制的下游基因的转录。阻遏蛋白Pol第39页,共74页,星期日,2025年,2月5日调控基因的正调控和负调控:负调控:调控基因编码的蛋白与操纵基因结合后能减弱或阻止结构基因转录的调控蛋白称为阻遏蛋白,其介导的调控方式称为负调控。正调控:与操纵基因或位于启动子上游的控制因子结合后能增强或启动结构基因转录的调控蛋白称为激活蛋白,其所介导的调控方式称为正调控。第40页,共74页,星期日,2025年,2月5日效应物(诱导物和辅助阻遏物)效应物:操纵子的开启与关闭受到环境因子的诱导,这种因子能与调控蛋白结合,改变调控蛋白的空间构象,从而改变其对基因转录的影响。这种因子称为效应物。凡能诱导操纵子开启的效应物,称为诱导物(比如乳糖);凡能导致操纵子关闭,阻碍转录过程发生的效应物称为辅助阻碍物(比如色氨酸)。第41页,共74页,星期日,2025年,2月5日原核生物操纵子的调控方式(p218):负控制的诱导模型(乳糖操纵子)负控制的阻遏模型(色氨酸操纵子
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