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;病毒粒子的化学分析时期
1935年斯坦莱(Stanley)提纯、结晶了烟草花叶病毒(TMV)
病毒的分子生物学研究时期
1952年Hershey和Chase证实噬菌体的遗传物质是DNA
1955年Franenkel-Conrant完成了TMV的体外拆开重组实验
1965年美科学家Spiegelman第一次在体外用无细胞体系复制E.Coil的RNA噬菌体成功。;非细胞生物;第一节病毒(Virus);第三章病毒和亚病毒因子;分布:
各种生物中,专性活细胞内的寄生物
与人类关系:
(1)至今人类和许多有益动物的疑难疾病和威胁性最大的传染病几乎都是病毒病;
(2)发酵工业中的噬菌体(细菌病毒)污染会严重危及生产;
(3)许多侵染有害生物的病毒则可制成生物防制剂而用于生产实践;
(4)许多病毒还是生物学基础研究和基因工程中的重要材料或工具。;第三章病毒和亚病毒因子;GeneralizedStructureofViruses;病毒大小;当前第10页\共有85页\编于星期五\20点;测量病毒大小的方法:;病毒的化学组成;2、病毒的蛋白质(p68);
构成病毒壳体,使病毒有一定大小形态,维持病毒结构。
具保护作用,使核酸免受酶或其他理化因子的影响。
参与病毒感染过程,决定宿主范围,表现为吸附作用。
决定病毒的抗原性(将蛋白质注入体内,即预防病毒感染的原理)
发生毒性反应的主要成分,对机体或细胞有毒性作用。
构成了病毒组成中的酶;3、脂质
4、碳水化合物
5、其他成分;;;毒粒(病毒颗粒):病毒的细胞外颗粒形式,也是病毒的感染性形式。;1、螺旋对称体病毒;螺旋对称的代表—烟草花叶病毒;2、二十面体对称病毒;当前第22页\共有85页\编于星期五\20点;3、复合对称;复合对称的代表—T偶数噬菌体;刺突tailpins;当前第26页\共有85页\编于星期五\20点;InfluenzaVirus–anEnvelopedViruswithaHelicalNucleocapsid;3.病毒的群体形态;5、枯斑:叶子上出现的坏死灶即枯斑。;当前第30页\共有85页\编于星期五\20点;;;当前第33页\共有85页\编于星期五\20点;枯斑;三、病毒的增殖方式(p73);当前第36页\共有85页\编于星期五\20点;(一)原核生物的病毒----噬菌体;噬菌体的形态;噬菌体的形态
;1、噬菌体的增殖(p73);(1)吸附(adsorption);(4)成熟(maturity);;当前第44页\共有85页\编于星期五\20点;当前第45页\共有85页\编于星期五\20点;吸附(adsorption);吸附(adsorption);当前第48页\共有85页\编于星期五\20点;吸附;当前第50页\共有85页\编于星期五\20点;2.侵入;当前第52页\共有85页\编于星期五\20点;增殖过程中基因表达的特点;增殖过程中基因表达特点(p74);dsDNA噬菌体的转录、翻译、复制增殖过程;核酸转录
蛋白质合成;T4DNA复制的特点:
1、由于T4DNA中的胞嘧啶被羟甲基胞嘧啶取代,所以在其DNA复制之前,必须由噬菌体编码的酶合成羟甲基胞嘧啶,并且在T4DNA合成后,羟甲基胞嘧啶被葡萄糖基化,以保护T4DNA免遭E.coli核酸酶破坏。
2、在T4DNA复制过程中,由6—8个拷贝结合形成非常长的DNA链。(多连体);左图:病毒核酸链接
入寄主核酸链
右图:病毒核酸复制;病毒核酸的转录;4成熟(装配);当前第61页\共有85页\编于星期五\20点;成熟的病毒粒子从被感染细胞内转移到外界的过程。
没有包膜的病毒合成溶解细胞的酶,引起内裂解。
有包膜的病毒以下图方式进行:;最后:大肠杆菌死亡并破裂,释放出里面的病毒,新一代病毒开始新的生命旅程;
(1)噬菌斑:在涂布有敏感宿主细胞的固体培养基表面,若接种上相应噬菌体的稀释液,其中每一噬菌体粒子由于先侵染和裂解一个细胞,然后以此为中心,再反复侵染和裂解周围大量的细胞,结果就会在菌苔上形成一个具有一定形状、大小、边缘和透明度的噬菌斑。
(2)效价:这一名词在不同的场合有不同的涵义。在这里,效价表示每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数。又称噬菌斑形成单位数或感染中心数。
;
(3)双层平板法:
底层平板(约2%琼脂培养基7-8ml)37℃
上层培养基(约1%琼脂培养基3ml)10余h计数
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