牛胚胎移植技术指南.pptxVIP

牛的胚胎移植

胚胎移植的概念指将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出，移植到另一头同种且生理状态相同的母畜体内，使之继续发育成为新个体的过程。胚胎移植实际上是由产生良种胚胎的供体和养育胚胎的受体分工合作共同繁殖后代的技术。

胚胎移植的意义充分发挥优良母畜的繁殖潜力，加速品种改良，扩大良种畜群；可以代替种畜的引进和保存品种资源；诱发肉牛产双胎；研究手段。

胚胎移植的生理基础母畜发情后生殖器官的孕向发育母畜发情后（周期性黄体期），不论受精与否，其生殖系统均处于受精后的生理状态。早期胚胎的游离状态早期胚胎（附植之前）处于游离状态，尚未与母体建立实质性的联系。早期胚胎的免疫耐受性在同一物种之内，一般不发生免疫排斥反应。胚胎遗传特性的稳定性胚胎的遗传信息在受精时就已确定，受体不能改变其遗传特性。

胚胎移植的基本原则移植前后所处的环境应是相同或相似的分类学上的一致性：供体和受体的亲缘关系近；生理学上的一致性：受体和供体发情时间上的同期性；解剖部位的一致性：输卵管——输卵管，子宫角——子宫角。胚胎收集和移植的期限胚胎采集和移植的期限不能超过周期黄体的寿命，最迟要在周期黄体退化之前数日进行。胚胎的质量移植的胚胎必须经过鉴定确认是发育正常的胚胎。

胚胎移植的基本原则移植前后所处的环境一致供体和受体在种属上必须一致；供体和受体在生理上必须一致供、受体在发情时间上应同期化，一般相差不超过24h，否则移植成功率显著下降；从供体中收集胚胎的部位与给受体移植胚胎的部位必须一致即从供体子宫角内收集到的胚胎应该移植到受体的子宫角内。

胚胎移植的基本原则移植的时间要适宜胚胎收集与移植的时间不能超过周期黄体的寿命，因此，胚胎的收集时间不能超过发情配种后第7天，最好是在发情配种后的第5～7天内进行。胚胎的发育应当正常胚胎的收集及移植过程应当严格按照要求进行，尽量不使其受到物理、化学或生物方面的影响。同时，胚胎移植前需进行鉴定，确定其发育正常者才能进行移植。

胚胎移植的程序供体和受体的选择超数排卵处理供体母牛的配种胚胎的收集胚胎的检查胚胎的移植移植后饲养管理

供体和受体的选择品种优良，生产性能好遗传性稳定，系谱清晰体质健壮，繁殖机能正常14月龄～10岁之间数量多，价格较低繁殖性能良好健康，无繁殖机能和传染疾病供体的选择受体的选择

供体和受体的处理在母畜（供体）发情周期的某一时期，用外源性的促性腺激素处理，从而促使其卵巢上较正常有更多个卵泡同时发育，并且能够同时或准同时排出多个具有受精能力的卵子，这一技术称为超数排卵，简称“超排”。利用某些外源激素人为控制并调整一群母畜发情周期的过程，使之在预定的时间内集中发情，以便有计划地合理组织胚胎移植所进行的同期化处理方法，也称同步发情。缩短黄体期的前列腺素法(PG法)延长黄体期的孕酮法

供体母牛的配种种公牛的要求系谱清楚检疫合格遗传性能稳定生产性能优良配种操作的要求母牛外阴部清洗消毒输精枪无菌合适的输精枪和输精部位有效精子不少于3×107输精次数不少于2次配种适宜的时间确定发情时12h后进行第一次人工输精，间隔12h进行第二次人工输精，每次输精的有效精子不少于3×107。

胚胎的收集器材的准备：冲胚管、注射器、二通管或三通管、培养皿等胚胎冲洗液的配制：杜氏磷酸缓冲液PBS，布林斯特液SOF合成输卵管液手术法收集胚胎输卵管冲胚：顺向冲胚、逆向冲胚子宫角冲胚非手术法收集胚胎二路法三路法

胚胎的收集手术法冲胚——输卵管输精后3～4天，受精卵绝大多数还在输卵管内，用注射器吸取冲洗液，连接穿刺针头，在子宫前端刺入，再送入输卵管峡部，注人冲洗液；另在输卵管伞端插入塑料导管，回收带有受精卵的冲洗液。

胚胎的收集手术法冲胚——子宫角输精后的5天冲卵，受精卵已绝大部分进入子宫角，即从子宫角上端注入冲卵液，在基部接收胚胎，或者反向冲洗。

胚胎的收集非手术法冲胚直肠把握法，适宜于5～7日龄胚胎

胚胎的收集非手术法冲胚利用双通式或三通式导管冲卵器，其外管前端均连接一气囊。当冲卵器插入子宫角大弯处时，给气囊充气（一般15～20mL）使其胀大，一方面固定于子宫角内，另一方面防止冲卵液经子宫颈流出。将冲卵液通过内管注入子宫角，然后导出冲洗液，反复冲洗5～10次，每次注冲洗液10～40mL。冲洗完一侧后，用同样方法再冲洗另一侧。此法简单易行，对生殖器官的伤害程度较小，因此在生产中较多采用。

胚胎的检查子宫角回收的液体较