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DBPDEHP单一及与Pb复合污染对土壤微生物量碳及土壤酶的影响研究

一、研究背景与意义

随着工业化进程的加速和农业生产方式的转变，土壤重金属与有机污染物复合污染问题日益凸显，对土壤生态系统的结构与功能构成严重威胁。邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DBPDEHP，通常简称DEHP）作为一种广泛应用于塑料、涂料、化妆品等领域的增塑剂，具有环境持久性、生物累积性和内分泌干扰特性，易通过农田灌溉、大气沉降、塑料薄膜残留等途径进入土壤环境，成为土壤中最常见的有机污染物之一。铅（Pb）作为典型的重金属污染物，在土壤中具有难迁移、易富集的特点，不仅会通过食物链危害人体健康，还会对土壤微生物群落和酶活性产生显著抑制作用。

当前，关于单一污染物对土壤生态系统的影响研究已较为广泛，但在实际污染环境中，土壤往往同时受到多种污染物的复合胁迫，单一污染研究难以准确反映真实污染场景下的生态效应。土壤微生物量碳（SMBC）作为土壤有机碳库中最为活跃的组分，是反映土壤微生物群落总量和土壤肥力水平的敏感指标，其含量变化直接体现了土壤微生物对污染胁迫的响应。土壤酶作为土壤生态系统中的“催化剂”，参与土壤有机质分解、养分循环等关键生化过程，其中脲酶、蔗糖酶、过氧化氢酶等酶活性的变化，能够快速指示土壤生态功能的受损程度。

因此，开展DBPDEHP单一及与Pb复合污染对土壤微生物量碳及土壤酶活性的影响研究，不仅能够明确两种污染物在复合污染中的交互作用（协同、拮抗或加和效应），揭示其对土壤生态系统的损伤机制，还能为土壤复合污染的风险评估、生态修复技术研发以及土壤环境质量标准制定提供科学依据，具有重要的理论价值和实践指导意义。

二、材料与方法

（一）供试材料

土壤样品：供试土壤采集于某典型农田0-20cm表层土壤，采样后去除石块、植物残体等杂质，经自然风干、研磨后过2mm筛，备用。土壤基本理化性质如下：pH值6.82，有机质含量18.5g/kg，全氮1.23g/kg，速效磷25.6mg/kg，速效钾120mg/kg，阳离子交换量（CEC）18.2cmol/kg。

污染物试剂：DEHP（纯度≥99%，分析纯），Pb（以Pb(NO?)?形式添加，纯度≥99%，分析纯），实验所用其他试剂均为分析纯或优级纯，实验用水为超纯水。

（二）实验设计

采用室内模拟培养法，设置对照组（CK，不添加任何污染物）、DEHP单一污染组、Pb单一污染组以及DEHP-Pb复合污染组，每组设置3次重复。

污染物浓度设置：参考土壤环境质量标准（GB15618-2018）及实际污染土壤中DEHP和Pb的含量水平，DEHP单一污染组设置3个浓度梯度：10mg/kg（低浓度，L1）、50mg/kg（中浓度，L2）、100mg/kg（高浓度，L3）；Pb单一污染组设置3个浓度梯度：100mg/kg（低浓度，P1）、300mg/kg（中浓度，P2）、500mg/kg（高浓度，P3）；复合污染组为DEHP与Pb各浓度梯度的组合，即L1P1、L1P2、L1P3、L2P1、L2P2、L2P3、L3P1、L3P2、L3P3。

培养过程：称取100g过2mm筛的土壤样品于500mL锥形瓶中，按照设计浓度分别添加DEHP（以丙酮为溶剂，均匀喷洒于土壤表面，对照组喷洒等量丙酮，待丙酮完全挥发后添加Pb溶液）和Pb(NO?)?溶液，充分混匀后调节土壤含水量至田间持水量的60%。将锥形瓶置于25℃恒温培养箱中避光培养，分别在培养第7d、14d、28d、56d取样，测定土壤微生物量碳和土壤酶活性。

（三）测定指标与方法

土壤微生物量碳（SMBC）测定：采用氯仿熏蒸-K?SO?浸提法。称取10g新鲜土壤样品，分为熏蒸组和未熏蒸组，熏蒸组用氯仿熏蒸24h，之后两组均用0.5mol/LK?SO?溶液浸提（土液比1:5），振荡30min后过滤，采用总有机碳分析仪测定浸提液中的有机碳含量，SMBC含量计算公式为：SMBC=（熏蒸组有机碳含量-未熏蒸组有机碳含量）/k，其中k为转换系数，取值0.45。

土壤酶活性测定：

脲酶活性：采用苯酚-次氯酸钠比色法，以24h内1g土壤中生成的NH?-N质量（mg）表示酶活性。

蔗糖酶活性：采用3,5-二硝基水杨酸比色法，以24h内1g土壤中生成的葡萄糖质量（mg）表示酶活性。

过氧化氢酶活性：采用高锰酸钾滴定法，以1h内1g土壤中分解的H?O?质量（mmol）表示酶活性。

（四）数据统计与分析

采用Excel2021进行数据整理，SPSS26.0软件进行单因素方差分析（ANOVA）和多重比较（LSD