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生物感染实验技能测试题库及答案

一、选择题（每题2分，共20题）

1.在进行无菌操作时，以下哪项操作错误？

A.手部消毒后用酒精灯火焰灭菌

B.培养皿和试管口在火焰上烧灼

C.无菌操作台面使用75%酒精擦拭

D.操作人员佩戴无菌手套并保持身体距离

2.细菌培养中最常用的培养基是？

A.血琼脂平板

B.麦康凯琼脂平板

C.琼脂糖培养基

D.琼脂蛋白胨培养基

3.消毒灭菌的常用方法不包括？

A.干热灭菌

B.高压蒸汽灭菌

C.紫外线照射

D.甲醛熏蒸

4.真菌培养时，最适宜的pH值范围是？

A.6.5-7.5

B.4.0-5.5

C.7.5-8.5

D.9.0-10.0

5.细菌革兰染色后，革兰氏阳性菌的特点是？

A.细胞壁较厚，染成红色

B.细胞壁较薄，染成蓝色

C.无细胞壁，不染色

D.细胞膜染成绿色

6.细菌计数常用的方法是？

A.显微镜直接计数法

B.涂片染色法

C.酶联免疫吸附试验（ELISA）

D.流式细胞术

7.病原菌的分离培养中，最常用的方法是？

A.直接涂片镜检

B.平板划线分离

C.显微镜观察

D.分子生物学检测

8.实验室中处理废弃培养物应采用？

A.直接丢弃

B.高压蒸汽灭菌后丢弃

C.浓硫酸浸泡后丢弃

D.乙醇浸泡后丢弃

9.细菌的抗生素敏感性试验常用？

A.革兰染色

B.碘淀粉试验

C.药敏纸片扩散法

D.肽核酸酶试验

10.真菌培养最适温度通常是？

A.25℃

B.37℃

C.45℃

D.55℃

二、填空题（每空1分，共10空）

1.细菌培养的基本条件包括：________、________、________和________。

2.无菌操作时，手部消毒常用________或________。

3.细菌的革兰染色分为________和________两种。

4.真菌培养常用的培养基是________或________。

5.细菌计数常用的单位是________或________。

6.抗生素敏感性试验的常用方法是________。

7.病原菌的分离培养中，平板划线分离的目的是________。

8.实验室废弃物处理应遵循________原则。

9.真菌培养最适pH值范围是________。

10.细菌的革兰氏阳性菌细胞壁厚度约为________。

三、简答题（每题5分，共4题）

1.简述无菌操作的基本原则。

2.解释革兰染色的原理及其意义。

3.简述平板划线分离法的操作步骤。

4.说明实验室废弃物处理的规范流程。

四、论述题（每题10分，共2题）

1.比较细菌培养与真菌培养的区别。

2.详细说明抗生素敏感性试验的操作步骤及其临床意义。

答案及解析

一、选择题答案

1.D（操作人员应保持身体与无菌物品的距离，避免污染）

2.A（血琼脂平板是最常用的细菌培养基，适用于多种细菌培养）

3.C（紫外线照射仅用于表面消毒，不能达到灭菌效果）

4.B（真菌生长最适pH值范围通常为4.0-5.5）

5.A（革兰氏阳性菌细胞壁较厚，能保留结晶紫染料，呈红色）

6.A（显微镜直接计数法是最常用的细菌计数方法）

7.B（平板划线分离是病原菌分离培养的常用方法）

8.B（废弃培养物必须高压蒸汽灭菌后才能丢弃）

9.C（药敏纸片扩散法是细菌抗生素敏感性试验的常用方法）

10.B（大多数细菌培养最适温度为37℃）

二、填空题答案

1.温度、湿度、氧气、营养

2.洗必泰、碘伏

3.阳性、阴性

4.麦康凯琼脂、沙氏培养基

5.CFU/mL、个/mL

6.药敏纸片扩散法

7.隔离单个菌落

8.无害化、减量化

9.4.0-5.5

10.20-30μm

三、简答题答案

1.无菌操作的基本原则：

-手部消毒：操作前用酒精或洗必泰消毒手部。

-无菌容器处理：使用无菌培养皿、试管等，开口处烧灼或酒精擦拭。

-操作环境：在超净工作台或生物安全柜内进行。

-避免污染：操作时避免身体接触无菌物品，动作轻柔。

2.革兰染色的原理及其意义：

-原理：利用细菌细胞壁的厚度差异，结晶紫染料被阳性菌保留，脱色后复染呈红色，阴性菌被脱色后染成蓝色。

-意义：帮助区分革兰氏阳性菌和阴性菌，指导后续抗生素选择。

3.平板划线分离法的操作步骤：

-将菌液均匀涂布在平板表面。

-用接种环在平板上划三条平行线，逐步稀释。

-恒温培养后观察菌落形态。

4.实验室废弃物处理的规范流程：

-化学废弃物：中和或灭菌后丢弃。

-生物废弃物：高压蒸汽灭菌后焚烧。

-液体废弃物：加入漂白粉或消毒剂后排放。

四、论述题答案

1.细菌培养