DB53_T 1433-2025 烟草抗番茄斑萎病毒鉴定技术规程.docxVIP

ICS65.160

CCSB35

DB53

云南省地方标准

DB53/T1433—2025

烟草抗番茄斑萎病毒鉴定技术规程

2025-10-29实施2025-07-29发布

2025-10-29实施

云南省市场监督管理局发布

国家标准、地方标准、行业标准、团体标准

I

DB53/T1433—2025

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由云南省烟草专卖局(公司)提出。

本文件由云南省烟草标准化技术委员会(YNTC12)归口。

本文件起草单位：云南省烟草农业科学研究院、云南省烟草公司昆明市公司。

本文件主要起草人：于海芹、黄昌军、刘勇、袁诚、曾建敏、童治军、姜宁、方敦煌、谢永辉。

DB53/T1433—2025

III

引言

本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，可能涉及到本标准的相关专利的使用，具体的专利如下：

一种抗番茄斑萎病毒烟草植株的筛选方法(ZL20161005486.3)

本文件的发布机构对于上述专利的真实性、有效性和范围无任何立场。

上述专利持有人已向本文件的发布机构保证，他们同意在公平、合理、无歧视基础上，免费许可任何组织或者个人在实施该地方标准时实施专利。相关信息可通过以下联系方式获得：

专利权人：云南省烟草农业科学研究院。

地址：云南省昆明市五华区圆通街33号。

请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

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DB53/T1433—2025

烟草抗番茄斑萎病毒鉴定技术规程

1范围

本文件规定了烟草植株材料抗番茄斑萎病毒(tomatospottedwiltorthotospovirus,TSWV)毒源制备与接种方法和烟草材料抗病性鉴定。

本文件适用于烟草的栽培品种、育种材料、种质资源以及野生种等植株材料对TSWV抗性的鉴定和评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T23222-2008烟草病虫害分级及调查方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

番茄斑萎病毒Tomatospottedwiltorthotospovirus,TSWV

TSW属于布尼亚病毒目(Bunyavirales),番茄斑萎病毒科(Tospoviridae),正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)。

3.2

烟草斑萎病Tobaccospottedwiltdisease,TSWD

由TSWV侵染烟草引起的病害，病害症状见附录A。

3.3

烟草抗TSW鉴定resistanceevaluationoftobaccoplantsagainstTSWV

指人工接种抗病性鉴定，依据TSWV侵染烟草植株的特性，叶片接种病毒，诱发病害，观察烟草植株对TSWV的病症反应，以病情指数差异评价烟草材料抗病性的过程。

4毒源制备与接种方法

4.1育苗

将本氏烟(Nicotianabenthamiana)(附录B)种子在温度为20℃~30℃温室或防虫网室中育苗，2片～3片真叶时移植至花盆中，挑选生长健壮的3片～4片真叶的烟苗，备用。

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DB53/T1433—2025

4.2接种条件

在人工气候箱、光照培养室或60目防虫日光温室中接种，温度宜为22℃~25℃、每日光照时间不少于14h、湿度宜为60%～80%。

4.3毒源制备

取仅感染TSWV的病叶1g,放于研钵中，加入5mL接种缓冲液(附录C)和2g石英砂(200目～400目),充分研磨至混合均匀，得到TSWV毒源汁液，置于冰盒上备用。

4.4接种方法及病害观察

选取4.1中烟苗，在第2片～3片真叶上均匀喷洒石英砂，每片叶取4.3TSWV毒源汁液500μL,摩擦烟苗真叶。

接种后用无菌水喷雾清洗叶片，暗培养出之后按4.2条件诱发病害。14d后，本氏烟表现出TSWV典型症状。

5烟草材料抗病性鉴定

5.1鉴定设计

试验设3次重复，随机排列，每个重复不少于1