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甘肃省结核分枝杆菌临床分离株基因分型及流行病学意义探究

一、引言

1.1研究背景

结核病（Tuberculosis，TB）是一种古老且严重危害人类健康的慢性传染病，由结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis，MTB）感染引起，主要通过呼吸道传播。在全球范围内，结核病的流行态势依然严峻。世界卫生组织（WHO）发布的《2024年全球结核病报告》显示，2023年全球有1080万新发结核病患者，较2022年的1070万例略有增加，也高于2021年的1040万例和2020年的1010万例，发病率为134/10万。2023年全球因结核病死亡的人数降至125万，恢复至2019年之前的水平，但结核病可能重新成为“全球最致命的传染病”，每年新增患者大多数发生在30个结核病高负担国家，2023年这些国家占全球发病总数的87%。

我国是全球30个结核病高负担国家之一，估算结核病发病数居全球第三位。2023年，我国估算的结核病新发患者数为74.1万，估算耐多药/利福平耐药结核病（MDR/RR-TB）患者为2.9万（占全球的7.3%），居第4位。尽管我国在结核病防控方面取得了一定成效，如发病率和死亡率均有所下降，但防控形势仍不容乐观，耐药结核病的出现和传播给防治工作带来了巨大挑战。

甘肃省作为我国结核病防控的重点地区之一，肺结核发病数长期位居甲乙类法定传染病第二位（病毒性肝炎第一位）。尽管近年来全省大力推动“防、诊、治、管、教”结核病综合防治服务新模式，肺结核报告发病率持续下降，结核病疫情得到有效遏制，但结核病防控工作任务依然艰巨而复杂。尤其是学生、老年人、糖尿病患者等重点人群以及耐药结核病防控工作，不仅是严重的公共卫生问题，也是重大的社会问题。了解甘肃省结核分枝杆菌的基因分型特征，对于掌握该地区结核病的流行规律、传播途径以及耐药情况等具有重要意义，能够为制定更加精准有效的防治策略提供科学依据。

1.2研究目的与意义

本研究旨在对甘肃省结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型，通过分析基因分型结果，了解该地区结核分枝杆菌的流行菌株类型、传播规律以及与耐药性的关联。具体而言，研究目的包括：明确甘肃省结核分枝杆菌临床分离株的主要基因分型，确定优势流行菌株；分析不同基因分型菌株的地域分布特征，探究传播模式；研究基因分型与耐药性之间的关系，揭示耐药菌株的分子特征。

本研究具有重要的理论和实践意义。在理论方面，基因分型技术的应用有助于深入了解结核分枝杆菌的遗传多样性和进化规律，丰富结核病分子流行病学的研究内容。不同地区的结核分枝杆菌基因分型存在差异，通过对甘肃省结核分枝杆菌基因分型的研究，可以补充该地区结核分枝杆菌遗传学信息，为全球结核病分子流行病学研究提供区域数据。在实践方面，明确流行菌株和传播规律，能够帮助公共卫生部门更有针对性地开展结核病监测和防控工作，如确定重点防控区域和人群，制定精准的防控措施，提高防控效率。了解基因分型与耐药性的关系，可为临床诊断和治疗提供参考，有助于实现个性化治疗，提高治疗成功率，减少耐药结核病的传播。对甘肃省结核分枝杆菌基因分型的研究，对于提升该地区乃至全国的结核病防控水平，保障人民群众的身体健康具有重要的公共卫生意义。

二、材料与方法

2.1样本收集

本研究于[具体时间区间]在甘肃省多家医疗机构，包括[列举主要合作医院名称]等，收集结核患者样本。共收集到[X]份临床样本，这些样本来源地区广泛，涵盖了甘肃省[具体列举样本来源的主要地区名称，如兰州、天水、酒泉等]等多个地区。患者信息包括年龄、性别、临床症状、病史等，其中年龄范围为[最小年龄]-[最大年龄]，男性患者[X]例，女性患者[X]例。样本选择标准为：经临床诊断疑似结核病患者，且痰液或其他样本（如胸水、脑脊液等）涂片抗酸染色阳性或结核分枝杆菌核酸检测阳性。选择这些样本的意义在于，能够准确获得结核分枝杆菌分离株，保证研究对象的准确性和可靠性，为后续基因分型及相关研究提供高质量的样本基础。通过广泛收集不同地区患者样本，有助于全面了解甘肃省结核分枝杆菌的基因分型特征和流行规律，为制定针对性的防控策略提供依据。

2.2菌株分离与培养

将收集到的样本在生物安全柜中进行处理，采用改良罗氏培养基进行分离培养。该培养基含有丰富的营养成分，如鸡蛋、甘油、天门冬素等，能满足结核分枝杆菌生长的特殊营养需求。培养条件为37℃、5%CO?，由于结核分枝杆菌细胞壁脂质含量高，影响营养物质吸收，生长缓慢，一般需2-4周长成肉眼可见的菌落。在培养过程中，每周观察一次菌落生长情况，记录菌落形态、颜色、质地等