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第一章基因工程

第一节基因工程概述

一．基因工程的概念

操作环境

操作对象

操作水平

基本过程

成果

生物体外

基因

分子水平

剪切→拼接→导入→体现

人类需要的基因产物

因为基因工程是在DNA分子水平上进行操作，所以又叫做重组DＮＡ技术。

二．基因工程的基本工具

(一)“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶)

１.起源:重要是从原核生物中分离纯化出来的。

２.功效:可以识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，而且使每一条链中特定部位的两

个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

3．成果:经限制酶切割产生的ＤNＡ片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

（二）“分子针线”——DNA连接酶

1.分类:依照酶的起源不一样，可分为Ｅ·ｃoｌiＤNA连接酶和T４ＤNA连接酶两类

2.功效：恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

★两种ＤNA连接酶(Ｅ·ｃoliＤＮＡ连接酶和T4DNA连接酶)的比较：

①相同点：都缝合磷酸二酯键

②区别:E.coIiＤNA连接酶起源于大肠杆菌，只能使黏性末端之间连接;

T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低。

★DNＡ连接酶与DＮA聚合酶作用的比较

DNA连接酶

DNＡ聚合酶

不一样点

连接的DNA

双链

单链

模板

不要模板

要模板

连接的对象

2个DNA片段

单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上

相同点