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2025年智慧树知到《分子克隆技术基础》考试题库及答案解析

就读院校：________姓名：________考场号：________考生号：________

一、选择题

1.分子克隆技术中，用于连接目的基因和载体的酶是（）

A.解旋酶

B.聚合酶

C.连接酶

D.限制性内切酶

答案：C

解析：分子克隆技术中，连接酶用于将目的基因和载体DNA通过磷酸二酯键连接在一起，形成重组DNA分子。解旋酶用于解开DNA双链，聚合酶用于合成DNA链，限制性内切酶用于切割DNA。

2.下列哪种载体不适合用于表达克隆？（）

A.质粒

B.噬菌体

C.病毒

D.YAC

答案：D

解析：YAC（酵母人工染色体）载体主要用于文库构建和较大片段DNA的克隆，不适合用于高效的表达克隆。质粒、噬菌体和病毒载体都是常用的表达载体，能够有效地在宿主细胞中表达外源基因。

3.PCR反应体系中，引物的作用是（）

A.延伸DNA链

B.解旋DNA双链

C.提供DNA合成的起始点

D.调节反应温度

答案：C

解析：PCR反应体系中，引物是短链DNA分子，能够特异性地结合到模板DNA的互补序列上，并提供DNA合成的起始点。DNA聚合酶从引物3端开始延伸DNA链。解旋DNA双链是由加热实现的，延伸DNA链是由DNA聚合酶实现的，调节反应温度是由PCR仪实现的。

4.下列哪种方法不适合用于DNA片段的纯化？（）

A.凝胶电泳

B.毛细管电泳

C.超速离心

D.层析柱

答案：C

解析：凝胶电泳、毛细管电泳和层析柱都是常用的DNA片段纯化方法，而超速离心主要用于分离细胞器、蛋白质复合物等大分子物质，不适合用于DNA片段的纯化。

5.限制性内切酶识别的序列通常是（）

A.随机序列

B.回文序列

C.特异性序列

D.变性序列

答案：B

解析：限制性内切酶识别的序列是DNA中的回文序列，即正向和反向互补的序列。大多数限制性内切酶具有特异性，只能识别和切割特定的DNA序列。

6.下列哪种培养基适合用于蓝白斑筛选？（）

A.LB培养基

B.SOC培养基

C.LB+Amp+IPTG+X-gal培养基

D.Luria-Bertani培养基

答案：C

解析：蓝白斑筛选是利用含IPTG和X-gal的培养基，通过α-互补作用检测重组质粒是否成功导入宿主细胞。只有含有氨苄青霉素抗性基因且插入片段破坏了NcoI和BamHI位点（α-互补位点）的质粒才能使宿主细胞产生蓝色菌落，而其他质粒则产生白色菌落。LB+Amp+IPTG+X-gal培养基适合用于蓝白斑筛选。

7.下列哪种方法不适合用于基因扩增？（）

A.PCR

B.RT-PCR

C.LCR

D.RFLP

答案：D

解析：PCR（聚合酶链式反应）、RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）和LCR（连接酶链式反应）都是基因扩增方法，而RFLP（限制性片段长度多态性）是一种基因分型技术，利用限制性内切酶和凝胶电泳分析DNA片段长度变化，不属于基因扩增方法。

8.下列哪种酶参与DNA复制？（）

A.蛋白激酶

B.转录酶

C.DNA聚合酶

D.解旋酶

答案：C

解析：DNA复制是指在细胞分裂前，DNA分子自我复制的过程。DNA聚合酶是DNA复制的关键酶，负责合成新的DNA链。蛋白激酶参与蛋白质磷酸化，转录酶参与RNA合成，解旋酶参与DNA双链解开。

9.下列哪种方法不适合用于基因测序？（）

A.Sanger测序

B.Maxam-Gilbert测序

C.基因芯片

D.测序反应

答案：C

解析：Sanger测序、Maxam-Gilbert测序和测序反应都是基因测序方法，而基因芯片主要用于基因表达分析、基因诊断等，不属于基因测序方法。

10.下列哪种物质是PCR反应的引物？（）

A.DNA聚合酶

B.dNTPs

C.DNA模板

D.特异性短链DNA或RNA

答案：D

解析：PCR反应的引物是特异性短链DNA或RNA，能够与模板DNA的互补序列结合，并提供DNA合成的起始点。DNA聚合酶负责延伸引物，dNTPs是合成DNA链的原料，DNA模板是PCR反应的模板。

11.下列哪种酶用于切割DNA产生粘性末端？（）

A.平末端切割酶

B.只识别单一识别位点的酶

C.能识别并列切割对称回文序列的酶

D.识别非回文序列的酶

答案：C

解析：能识别并列切割对称回文序列的酶（如EcoRI）会在识别位点内部切割DNA，产生具有互补单链突出的粘性末端。平末端切割酶产生平末端，不具粘性。只识别单一识别位点的酶描述不够准确，因为有些酶识别序列有轻微变异性。识别非回文序列的酶可能产生平末端或随机切割。

12.下列哪种载体常用于表达真核生物蛋白？（）

A.噬菌体载体

B.真菌载体