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碳氮比驱动下沼液短程硝化反硝化中微生物群落与功能基因的响应机制

一、引言

1.1研究背景与意义

随着畜禽养殖业的规模化和集约化发展，大量的畜禽粪便产生并通过厌氧发酵处理，产生了丰富的沼液资源。沼液中含有高浓度的氮、磷等营养物质，如未经有效处理直接排放，会导致水体富营养化、土壤污染等一系列环境问题，对生态系统和人类健康构成严重威胁。因此，沼液的有效处理和资源化利用成为亟待解决的关键问题，这对于实现农业可持续发展、保护生态环境具有至关重要的意义。

传统的生物脱氮工艺，如全程硝化反硝化，在处理沼液时存在诸多弊端。全程硝化反硝化需要将氨氮先氧化为硝酸盐，再还原为氮气，这一过程不仅能耗高，而且对碳源的需求量大。由于沼液本身碳氮比偏低，在采用传统工艺时往往需要额外投加大量碳源，增加了处理成本。此外，传统工艺还存在反应时间长、污泥产量大等问题，限制了其在沼液处理中的广泛应用。

短程硝化反硝化技术作为一种新型的生物脱氮工艺，具有显著的优势。它将氨氮氧化控制在亚硝酸盐阶段，然后直接以亚硝酸盐为电子受体进行反硝化脱氮，缩短了反应路径。这一技术理论上可节省25%左右的曝气量，从而降低能耗；在缺氧段可节约40%的有机碳源需求量，减少了碳源投加成本；同时，还能大幅减少污泥产量，降低后续污泥处理的难度和成本。并且，亚硝酸盐的反硝化反应速率是硝酸盐反硝化速率的1.5-2.0倍，提高了脱氮效率，能有效弥补传统生物脱氮的缺陷，在沼液处理领域展现出巨大的应用潜力。

在短程硝化反硝化过程中，碳氮比是一个关键的影响因素。碳源是反硝化过程中微生物生长和代谢的能量来源及电子供体，合适的碳氮比对于维持微生物的正常代谢活动、保证短程硝化反硝化的顺利进行至关重要。不同碳氮比的沼液会导致微生物群落结构发生显著变化。当碳氮比较低时，反硝化细菌可能因缺乏足够的碳源而生长受到抑制，其在群落中的相对丰度下降；而氨氧化细菌等可能会相对富集，以适应低碳高氮的环境。相反，碳氮比较高时，反硝化细菌可能成为优势菌群，群落结构也会相应改变。这些群落结构的变化又会进一步影响微生物的功能基因表达。例如，碳氮比的改变可能会诱导反硝化细菌中与碳源利用、电子传递等相关功能基因的表达上调或下调，从而影响反硝化速率和效果。同时，对于氨氧化细菌，碳氮比也可能影响其与氨氧化相关功能基因的表达，进而影响亚硝酸盐的积累和后续的反硝化过程。

深入研究不同碳氮比沼液短程硝化反硝化群落结构与功能基因，有助于揭示短程硝化反硝化过程的微生物学机制，为优化沼液处理工艺提供坚实的理论基础。通过了解微生物群落结构随碳氮比的变化规律，可以针对性地调控微生物群落，使其更有利于短程硝化反硝化的进行，提高沼液处理效率和稳定性。对功能基因的研究能够从分子层面揭示微生物的代谢途径和调控机制，为开发高效的生物强化技术提供科学依据，如通过基因工程手段构建高效的脱氮微生物菌株，或者利用功能基因监测短程硝化反硝化过程，实现对沼液处理工艺的精准控制。这对于推动沼液处理技术的发展，实现沼液的无害化处理和资源化利用具有重要的现实意义，有助于减少环境污染，促进农业生态系统的良性循环，保障农业的可持续发展。

1.2国内外研究现状

在不同碳氮比沼液短程硝化反硝化处理效果方面，国内外学者已开展了大量研究。有研究采用缺氧/好氧一体化处理装置处理碳氮比为0.8-1.5的猪场沼液，在室温25±1℃，控制反应器溶解氧为4.0-6.0mg/L，pH在7.7±0.2时，15天成功启动短程硝化反硝化反应器，启动期间氨氮去除率在80.5%以上，亚硝氮积累率稳定在70.4%以上。当水力停留时间（HRT）为12d，氨氮负荷为0.2-0.3kg（NH3-N）/kgMLSS/d，回流比为400.0%时，系统对于氨氮、总氮（TN）、化学需氧量（CODCr）的去除率分别达到96.4%、78.1%、77.4%。研究还发现，碳氮比降低对系统总氮去除的影响大于对氨氮和COD去除的影响。碳氮比为10.8时，COD平衡去除率为92.0%，氨氮平衡去除率为94.6%，总氮平衡去除率为92.6%；碳氮比降至4.2时，COD平衡去除率为79.0%，氨氮平衡去除率为95.9%，但总氮平衡去除率仅为80.6%。

关于微生物群落结构，诸多研究运用高通量测序等技术进行分析。在处理低碳氮比废水时，发现氨氧化菌（AOB）中的Nitrosomonas属在短程硝化系统中占据重要地位，其相对丰度的变化与短程硝化的稳定性密切相关。当碳氮比发生变化时，反硝化菌的群落结构也会相应改变。在高碳氮比条件下，一些具有高效反硝化能力的菌种如Pseudomonas属相对丰度增加；而低碳氮比时，部分反硝化菌的生长受到抑制，