2025年生化化工药品技能考试-生物制药考试近5年真题集锦（频考类试题）带答案.docxVIP

2025年生化化工药品技能考试生物制药考试近5年练习题集锦（频考类试题）带答案

详细内容

一、选择题

1.单选题

题目：重组DNA技术中，常用的克隆载体不包括以下哪一项？

A.质粒

B.病毒载体

C.噬菌体载体

D.线粒体

答案：D

解析：线粒体是真核细胞中的细胞器，不是用于克隆的载体。质粒、病毒载体和噬菌体载体都是常用的克隆载体。

2.多选题

题目：以下哪些方法可以用于蛋白质的纯化？

A.盐析

B.凝胶过滤

C.离子交换层析

D.聚丙烯酰胺凝胶电泳

答案：A,B,C,D

解析：盐析利用蛋白质在不同盐浓度下的溶解度差异进行纯化；凝胶过滤根据分子大小进行分离；离子交换层析根据电荷差异分离；聚丙烯酰胺凝胶电泳则根据分子大小和电荷进行分离。

二、填空题

1.题目：在基因工程中，常用的限制性内切酶识别序列通常是______。

答案：回文序列

解析：限制性内切酶识别的序列通常是回文序列，即正读和反读都相同的序列，便于酶切割DNA。

2.题目：单克隆抗体的制备过程中，常用的细胞融合剂是______。

答案：聚乙二醇（PEG）

解析：聚乙二醇（PEG）是一种常用的细胞融合剂，能够促进细胞膜的融合，从而制备单克隆抗体。

三、判断题

1.题目：PCR技术可以用于扩增特定的DNA片段。

答案：正确

解析：PCR（聚合酶链式反应）技术通过特异性引物和DNA聚合酶，可以在体外大量扩增特定的DNA片段。

2.题目：所有的抗生素都可以通过发酵法生产。

答案：错误

解析：虽然许多抗生素是通过发酵法生产的，但也有一些抗生素是通过化学合成或半合成方法制备的。

四、简答题

1.题目：简述基因工程的基本步骤。

答案：

1.目的基因的获取：通过PCR、基因文库筛选等方法获取所需的目的基因。

2.载体的选择与构建：选择合适的克隆载体（如质粒、噬菌体等），并将目的基因插入载体中。

3.重组DNA分子的导入：将构建好的重组DNA分子导入宿主细胞（如大肠杆菌）。

4.筛选与鉴定：通过抗生素抗性筛选、PCR鉴定等方法筛选出含有目的基因的重组子。

5.表达与纯化：在宿主细胞中表达目的蛋白，并通过各种纯化方法获得纯化的蛋白。

2.题目：解释什么是单克隆抗体，并简述其制备过程。

答案：

单克隆抗体：由单一B细胞克隆产生的，针对特定抗原表位的抗体，具有高度特异性和均一性。

制备过程：

1.免疫小鼠：用特定抗原免疫小鼠，使其产生特异性B细胞。

2.细胞融合：将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞在聚乙二醇（PEG）作用下融合，形成杂交瘤细胞。

3.筛选杂交瘤细胞：通过HAT培养基筛选出既能生长又能分泌抗体的杂交瘤细胞。

4.克隆化培养：对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养，确保单克隆性。

5.抗体检测与纯化：检测杂交瘤细胞分泌的抗体，并进行大规模培养和纯化。

五、计算题

1.题目：某蛋白质样品在SDSPAGE电泳中的迁移率为0.65，已知标准蛋白的分子量与其迁移率的关系为：log(MW)=0.2×Rf+3.5。计算该蛋白质的分子量。

答案：

根据题目给出的关系式：log(MW)=0.2×Rf+3.5

将Rf=0.65代入：

log(MW)=0.2×0.65+3.5

log(MW)=0.13+3.5

log(MW)=3.37

通过反对数计算：

MW=10^3.37≈2312.8

所以，该蛋白质的分子量约为2312.8Da。

六、实验设计题

1.题目：设计一个实验方案，验证某新型抗生素对金黄色葡萄球菌的抑制作用。

答案：

实验目的：验证新型抗生素对金黄色葡萄球菌的抑制作用。

实验材料：

新型抗生素溶液

金黄色葡萄球菌菌株

营养琼脂培养基

无菌培养皿、接种环、移液器等

实验步骤：

1.菌悬液制备：将金黄色葡萄球菌接种于营养肉汤中，37℃培养24小时，制备成菌悬液。

2.培养基制备：配制营养琼脂培养基，灭菌后倒入无菌培养皿，制成平板。

3.接种：用无菌接种环将菌悬液均匀涂布于平板表面。

4.加药：在平板上放置无菌牛津杯，分别加入不同浓度的新型抗生素溶液。

5.培养：将平板倒