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基于RAPD标记技术解析华东葡萄抗白粉病和霜霉病基因的遗传密码

一、引言

1.1研究背景

葡萄作为世界上广泛种植且极具经济价值的果树之一，在全球农业经济中占据重要地位。它不仅能鲜食，满足人们对美味水果的需求，还是酿造葡萄酒、制作葡萄干等加工产品的关键原料。随着人们生活水平的提高和消费市场的不断扩大，对葡萄及其加工产品的需求持续增长，这极大地推动了葡萄产业的蓬勃发展。

然而，在葡萄的生长过程中，白粉病和霜霉病是两类极具威胁性的病害。葡萄白粉病是一种由真菌引起的病害，在我国各葡萄产区均有分布，尤其在北方干旱种植区危害严重。其病原菌以菌丝体在被害组织内或芽鳞间越冬，次年借气流传播进行初侵染，发病后产生的分生孢子可不断进行再侵染。该病害主要侵袭葡萄的叶片、新梢及果实等幼嫩器官，染病叶片初期出现白色或褪绿色小斑，随后病斑扩大，表面长出粉白色霉斑，严重时布满整个叶片，导致叶片卷缩或干枯；嫩蔓染病初现灰白色小斑，后变为不规则大褐斑，上覆灰白色粉状物；果实染病出现黑色芒状花纹，上覆一层白粉，病部表皮变为褐色或紫褐色至灰黑色，果实畸形、易龟裂，发酸且穗轴和果实变脆。白粉病在葡萄生长季节初期影响坐果和果粒发育，后期严重时会引起果粒开裂，不仅降低葡萄的产量，还使果实品质大幅下降，失去食用价值和加工价值，叶片染病严重时可减产80%以上。

葡萄霜霉病同样是一种严重危害葡萄生长的病害，主要危害叶片，也能侵染新梢幼果等幼嫩组织。其病原为葡萄霜霉菌，属鞭毛菌亚门，以卵孢子在病组织中或随病叶残留于土壤中越冬，次年借风雨传播，从叶背气孔侵入进行初次侵染，发病后产生的孢子囊和游动孢子可进行再次侵染。叶片被害初生淡黄色水渍状边缘不清晰的小斑点，后扩大为褐色不规则形或多角形病斑，数斑相连成大斑，潮湿时病斑背面产生白色霜霉状物，发病严重时病叶早枯早落；嫩梢受害形成水渍状斑点，后变为褐色略凹陷病斑，潮湿时也产生白色霜霉，病重时新梢扭曲、生长停止甚至枯死；幼果被害病部褪色、变硬下陷，上生白色霜霉，易萎缩脱落。霜霉病发病严重时可使当年减产10%-20%，并显著影响第二年的产量。

目前，针对这两种病害，生产上主要依赖化学药剂进行防治。但长期大量使用化学药剂不仅增加了生产成本，还容易导致病原菌产生抗药性，使防治效果逐渐下降。同时，化学药剂的残留问题也对环境和食品安全构成威胁。因此，培育具有高抗病性的葡萄品种成为解决病害问题的根本途径。

华东葡萄作为中国特有的野生葡萄种，在长期的自然选择过程中，对当地的生物和非生物逆境形成了独特的适应性，蕴含着丰富的抗病基因资源。研究表明，华东葡萄对白粉病和霜霉病表现出一定的抗性，挖掘和利用其抗病基因，对于丰富葡萄抗病育种的基因库，培育抗病新品种具有重要意义。通过对华东葡萄抗白粉病和霜霉病基因的研究，有望揭示其抗病的分子机制，为葡萄抗病育种提供理论基础和技术支持，推动葡萄产业的可持续发展。

1.2研究目的与意义

本研究旨在利用RAPD（RandomAmplifiedPolymorphicDNA，随机扩增多态性DNA）技术，对华东葡萄抗白粉病和霜霉病基因进行标记研究。通过筛选与抗病基因紧密连锁的RAPD标记，建立快速、准确的分子标记辅助选择体系，为葡萄抗病育种提供有效的工具。具体而言，本研究期望达到以下目的：一是利用RAPD技术，筛选出与华东葡萄抗白粉病和霜霉病基因紧密连锁的分子标记；二是验证这些标记在不同葡萄材料中的稳定性和可靠性；三是为葡萄抗病分子育种提供理论依据和实践指导，加快抗病新品种的选育进程。

从理论意义来看，本研究有助于深入了解华东葡萄抗白粉病和霜霉病的分子机制，丰富葡萄抗病遗传学的理论知识。通过挖掘抗病基因及其连锁标记，揭示葡萄抗病性的遗传规律，为进一步研究葡萄与病原菌的互作机制奠定基础。在实践应用方面，分子标记辅助选择技术能够在早期对葡萄植株的抗病性进行准确鉴定，大大缩短育种周期，提高育种效率，减少传统育种过程中对大量田间种植和病害接种鉴定的依赖，降低育种成本。同时，培育出的抗病新品种能够减少化学药剂的使用，降低环境污染，保障食品安全，促进葡萄产业的绿色、可持续发展。

二、文献综述

2.1葡萄白粉病与霜霉病

2.1.1病害概述

葡萄白粉病是一种在全球葡萄产区广泛分布的重要病害，其病原菌为葡萄钩丝壳菌（UncinulanecatorSchwein.），属子囊菌亚门真菌。该病害主要侵袭葡萄的叶片、新梢及果实等幼嫩器官，发病初期，叶片表面会出现白色或褪绿色小斑点，随后病斑逐渐扩大，形成粉白色霉斑，严重时霉斑布满整个叶片，导致叶片卷曲、干枯。新梢染病后，初期出现灰白色小斑，随着病情发展，病斑变为不规则大褐斑，上覆灰白色粉状物，影响新梢的正常生长和发育。果实受害时，表面会出现黑色芒状花纹，并覆盖一层白粉