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南方农业学报JournalofSouthernAgriculture2024,55(4):1207-1215
ISSN2095-1191;CODENNNXAAB
DOI:10.3969/j.issn.2095-1191.2024.04.028
克氏原螯虾Dmrt1基因克隆及表达特征分析
1221111
陆专灵,纪月鑫,戴龙喜,王大鹏,郭忠宝,肖俊,梁正,
112*
黄彬胜,杨冬玲,韦友传
1
(广西水产科学研究院/农业农村部中国(广西)—东盟水产种质资源综合开发与利用重点实验室(部省共建)/广西水产遗传育种与
2
健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西大学动物科学技术学院,广西南宁530004)
摘要:【目的】克隆克氏原螯虾(Procambarusclarkii)Dmrt1基因(PcDmrt1),分析其在雌性和雄性克氏原螯虾
不同组织中及不同发育时期性腺中的表达特征,为研究克氏原螯虾性别分化与发育提供理论依据。【方法】克隆
PcDmrt1基因开放阅读框(ORF),并对其进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR检测PcDmrt1基因在雌性和雄
性克氏原螯虾不同组织及不同发育时期性腺中的表达特征。【结果】PcDmrt1基因ORF长1752bp,共编码583个氨基酸
残基。PcDmrt1蛋白分子量64.9kD,理论等电点(pI)为9.51,包含2个DM结构域。同源比对分析表明,克氏原螯虾
PcDmrt1氨基酸序列与红螯螯虾(Cheraxquadricarinatus)Dmrt氨基酸序列同源性最高,为61.2%。基于Dmrt氨基酸
序列相似性构建的系统发育进化树表明,克氏原螯虾与东澳岩龙虾(Sagmariasusverreauxi)、红螯螯虾和美洲螯龙虾
(Homarusamericanus)亲缘关系较近。PcDmrt1基因在克氏原螯虾性腺、肝胰腺、鳃、脑、眼柄、肌肉和肠道7个组织中
均有表达,性腺中相对表达量最高,肝胰腺和眼柄次之,在其他组织中相对表达量较低,在性腺、肝胰腺和眼柄3个组
织中,雌性和雄性克氏原螯虾Pcdmrt1基因相对表达量存在显著(P0.05)或极显著(P0.01,下同)差异。在克氏原
螯虾不同发育时期,PcDmrt1基因相对表达量在出膜后5d出现高峰,最高表达出现在出膜后40d,此时雄性幼虾
PcDmrt1基因相对表达量极显著高于雌性幼虾。【结论】克氏原螯虾PcDmrt1蛋白含有2个DM结构域,属于典型的
Dmrt家族成员,在进化上保守。PcDmrt1基因广泛表达于克氏原螯虾各组织中并在性腺中高表达,基因相对表达量
在发育早期呈上升趋势,表明PcDmrt1基因可能在早期参与克氏原螯虾性别分化与组织发育。
关键词:克氏原螯虾;Dmrt1基因;组织分布;性别调控
中图分类号:S917.4文献标志码:A文章编号:2095-1191(2024)04-1207-09
GenecloningandexpressioncharacteristicsofDmrt1genein
Procambarusclarkii
1221
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