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检验科常见实验室检验技术指南

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目录

CONTENTS

临床生化检验技术

1

血液学检验技术

2

免疫学检验技术

3

微生物检验技术

4

分子诊断技术

5

质量控制技术

6

临床生化检验技术

Part.

01

通过酶促反应将葡萄糖转化为葡萄糖酸和过氧化氢,再经显色反应定量测定血糖浓度,具有高特异性和灵敏度,适用于空腹及餐后血糖监测。

葡萄糖氧化酶法

检测血清甘油三酯时,通过酶解甘油三酯释放甘油,再经氧化反应生成显色物质,结合分光光度法计算浓度,需注意溶血和脂血样本的干扰。

甘油磷酸氧化酶法

利用己糖激酶催化葡萄糖生成6-磷酸葡萄糖,通过NADPH的生成量间接反映血糖水平,常用于自动化分析仪,抗干扰能力强。

己糖激酶法

01

03

02

血糖与血脂检测方法

采用选择性沉淀或均相法分离高/低密度脂蛋白,结合胆固醇检测技术,评估心血管疾病风险,需严格校准试剂和标准品。

直接测定法(HDL/LDL)

04

肝肾功能指标分析

丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测

通过速率法监测ALT催化丙氨酸与α-酮戊二酸反应生成的丙酮酸,反映肝细胞损伤程度,需排除剧烈运动或药物对结果的干扰。

01

肌酐酶法测定

利用肌酐酶水解肌酐生成肌酸,再通过偶联反应生成红色化合物,定量评估肾小球滤过功能,需注意样本溶血对肌酸激酶的潜在影响。

02

尿素氮(BUN)检测

采用脲酶-谷氨酸脱氢酶偶联法,将尿素分解为氨和二氧化碳,通过监测NADH的消耗量计算浓度,需避免样本放置时间过长导致氨挥发。

03

白蛋白溴甲酚绿法

基于白蛋白与溴甲酚绿结合后吸光度变化的原理,评估肝脏合成功能,需控制反应pH值和温度以保证准确性。

04

电解质与血气检测流程

离子选择性电极法(Na+/K+/Cl-)

01

通过电极膜特异性结合待测离子产生电位差,直接测定血清或全血中电解质浓度,需定期校准电极并避免样本气泡干扰。

血气分析(pH/pCO2/pO2)

02

采用电化学传感器测量血液中气体分压及酸碱度,需严格厌氧采集动脉血,并在15分钟内完成检测以防止细胞代谢影响结果。

钙离子偶氮胂Ⅲ法

03

通过钙离子与偶氮胂Ⅲ形成紫色复合物,分光光度法测定总钙浓度,需注意标本溶血或脂血对吸光度的干扰。

二氧化碳结合力(CO2CP)检测

04

利用酸碱滴定法或酶法测定血浆中HCO3-含量,评估酸碱平衡状态,需避免样本暴露空气导致CO2逸散。

血液学检验技术

Part.

02

全血细胞计数规范

采用标准化静脉采血技术,使用EDTA抗凝管,避免溶血或凝血,采血后需在特定时间内完成检测以保证结果准确性。

标本采集与处理

分析红细胞、白细胞、血小板计数及血红蛋白浓度等指标,结合临床判断贫血、感染或血液系统疾病的可能性。

参数解读与临床意义

定期对血细胞分析仪进行校准,每日运行高、中、低三个水平的质控品,确保仪器性能稳定和检测结果可靠。

仪器校准与质控

01

03

02

制定严格的复检流程,如遇血小板聚集、白细胞分类异常等情况,需进行人工涂片镜检以确认结果。

异常结果复检规则

04

凝血功能检测标准

标本采集要求

使用枸橼酸钠抗凝管,严格掌握血液与抗凝剂比例,避免采血不畅或混匀不当导致凝血因子激活。

检测项目选择

根据临床需求选择PT(凝血酶原时间)、APTT(活化部分凝血活酶时间)、FIB(纤维蛋白原)及D-二聚体等组合检测。

影响因素控制

排除患者用药(如华法林、肝素)、血脂或溶血标本对结果的干扰,确保检测环境温湿度符合标准。

危急值报告流程

对INR(国际标准化比值)显著延长或D-二聚体异常升高等结果,需立即与临床沟通并记录处理过程。

骨髓穿刺操作规范

严格无菌操作,选择髂后上棘或胸骨为穿刺点,抽取适量骨髓液用于涂片和培养,避免血液稀释影响诊断。

涂片制备与染色

采用推片法制备薄而均匀的骨髓涂片,使用瑞氏-吉姆萨染色,确保细胞形态清晰可辨。

显微镜下分类计数

按标准对粒系、红系、巨核系及淋巴细胞等分类计数,计算各阶段细胞比例,识别病态造血或异常细胞。

结果整合与报告

结合细胞形态、比例及临床资料,撰写描述性诊断意见,对白血病、骨髓增生异常综合征等疾病提供分级建议。

骨髓细胞学检查步骤

免疫学检验技术

Part.

03

ELISA通过酶标记抗体或抗原与待测物特异性结合,利用底物显色反应定量检测目标物质,包括直接法、间接法、夹心法和竞争法四种主要类型,适用于蛋白质、激素、病毒抗体等检测。

酶联免疫吸附试验(ELISA)

基本原理与分类

需严格规范包被、封闭、加样、孵育、洗涤、显色和终止等步骤,确保反应体系的稳定性和重复性,避免因温度、时间或pH偏差导致假阳性/阴性结果。

操作流程标准化

广泛用于传染病(如HIV、乙肝)、肿瘤标志物(如AFP、CEA)、过敏原筛查及自身免疫疾病诊断,具有高灵敏度(可

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