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生物实验技巧测试题及答案指南

一、选择题（每题2分，共20题）

1.在进行显微镜操作时，若视野模糊，应首先调节哪个部分？

A.光圈

B.转换器

C.聚焦环

D.物镜

2.配制0.1mol/LNaCl溶液时，应使用哪种工具称量氯化钠？

A.天平（精度0.01g）

B.量筒

C.滴定管

D.容量瓶

3.进行琼脂糖凝胶电泳时，DNA片段迁移速率主要受什么因素影响？

A.电场强度

B.凝胶浓度

C.DNA片段大小

D.以上都是

4.在动物细胞培养中，维持培养液pH值通常使用哪种缓冲液？

A.HCl

B.NaOH

C.HEPES

D.以上都可以

5.使用移液器吸取液体时，正确的手部姿势是？

A.直接插入液体中吸取

B.先挤压活塞，再插入液体

C.快速插入和拔出以减少误差

D.用力按压活塞以加速吸取

6.进行酶活性测定时，若酶促反应速率过快，应如何调整？

A.增加底物浓度

B.降低反应温度

C.延长反应时间

D.加入抑制剂

7.在进行PCR实验时，引物退火温度应根据什么因素确定？

A.引物长度

B.GC含量

C.退火温度范围

D.以上都是

8.使用移液枪进行微量分装时，为减少误差，应遵循哪个原则？

A.快速操作

B.等待枪头内液体平衡

C.反复抽吸

D.使用更大容量的移液枪

9.进行蛋白质印迹（WesternBlot）时，抗体孵育的目的是？

A.与目标蛋白结合

B.清洗背景

C.增加信号强度

D.以上都是

10.在进行植物组织培养时，为防止污染，应采取哪些措施？

A.高压灭菌所有工具

B.使用无菌操作台

C.定期更换培养基

D.以上都是

二、填空题（每空1分，共10题）

1.显微镜下观察细胞时，为提高分辨率，应使用______物镜。

2.配制缓冲液时，通常需要考虑______和______两个关键参数。

3.电泳时，DNA片段的迁移方向是______极到______极。

4.细胞培养过程中，CO?培养箱的浓度通常维持在______%。

5.移液枪的刻度从______到______，单位为______。

6.PCR反应体系通常包含______、______和______等核心组分。

7.WesternBlot中，一抗和二抗的孵育温度通常分别为______℃和______℃。

8.植物组织培养中，诱导愈伤组织形成的培养基通常添加______激素。

9.电镜观察细胞结构时，需要使用______固定和______染色。

10.细胞计数时，常用______法或______法进行统计。

三、简答题（每题5分，共5题）

1.简述显微镜油镜的使用步骤及注意事项。

2.如何判断PCR反应是否成功？列举三种常见的检测方法。

3.简述动物细胞培养过程中，培养基的基本成分及其作用。

4.电泳时，若DNA条带模糊，可能的原因有哪些？如何解决？

5.在进行植物组织培养时，如何防止玻璃器皿污染？

四、实验设计题（每题10分，共2题）

1.设计一个实验方案，验证某种环境因素（如温度、pH值）对酶活性的影响。

要求：说明实验材料、主要步骤、对照组设置及结果预测。

2.设计一个实验方案，比较两种不同提取方法（如研磨法、超声波法）对植物总RNA提取效率的影响。

要求：说明实验材料、主要步骤、对照组设置及结果预测。

答案及解析

一、选择题答案

1.C（聚焦环用于调节清晰度）

2.A（天平用于精确称量）

3.D（电场强度、凝胶浓度和DNA片段大小都会影响迁移速率）

4.C（HEPES是常用缓冲液）

5.B（先挤压活塞，再插入液体以避免吸入空气）

6.B（降低温度可减慢反应速率）

7.D（引物长度、GC含量和退火温度范围都会影响退火温度）

8.B（等待枪头内液体平衡可减少误差）

9.D（抗体孵育需结合目标蛋白、清洗背景和增强信号）

10.D（高压灭菌、无菌操作台和定期更换培养基都是防止污染的措施）

二、填空题答案

1.高倍（油镜）

2.pH值、离子强度

3.正、负

4.5%

5.0.1-1000μl、μl

6.引物、模板DNA、Taq酶

7.4-6、20-25

8.生长素（IAA）

9.戊二醛、醋酸铋

10.显微计数、血细胞计数

三、简答题答案

1.油镜使用步骤及注意事项：

-步骤：

1.先用低倍镜找到目标，移开装片；

2.转换器选择油镜，滴加1-2滴专用油；

3.将物镜浸入油中，缓慢提升镜筒观察。

-注意事项：

-不能用干镜片接触油；

-观察后需用专用擦镜纸擦拭；

-油镜镜头易脏，需定期清洁。

2.PCR成功判断方法：

-电泳检测（观