单克隆抗体的制备(详细材料)之欧阳美创编.pptxVIP

2025/07/22单克隆抗体的制备汇报人：_1751850234

CONTENTS目录01单克隆抗体概述02单克隆抗体的制备方法03单克隆抗体的应用领域04单克隆抗体技术难点05单克隆抗体的未来趋势

01单克隆抗体概述

定义与特性单克隆抗体的定义单克隆抗体源自单一的B细胞克隆，展现出极高的特异性与一致性。单克隆抗体的特性单克隆抗体凭借其独特的单一抗原结合特性，能够精确锁定并与特定抗原相契合，适用于疾病的诊断与治疗过程。

发展历程发现杂交瘤技术1975年，K?hler和Milstein发明杂交瘤技术，为单克隆抗体的制备奠定了基础。临床应用的突破在1986年，美国食品药品监督管理局（FDA）首次批准利妥昔单抗这一单克隆抗体药物用于治疗非霍奇金淋巴瘤。基因工程的融合随着基因工程技术的发展，重组DNA技术被用于生产单克隆抗体，提高了产量和纯度。治疗性单抗的多样化迈入21世纪，单克隆抗体药物类型日益丰富，广泛用于治疗癌症、自身免疫等多种病症。

02单克隆抗体的制备方法

杂交瘤技术01免疫小鼠制备注射特定抗原至小鼠体内，可诱发其免疫系统生成特定抗体。02细胞融合过程将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。03筛选与克隆化从HAT培养基中筛选出能分泌特定单克隆抗体的杂交瘤细胞，随后对这些细胞进行克隆扩增。

基因工程方法基因克隆技术通过PCR扩增特定抗体基因片段，然后将其克隆到表达载体中，用于后续的抗体生产。细胞融合技术通过细胞融合方法，将具备产生抗体能力的B细胞与癌细胞相结合，成功构建出能够持续分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。噬菌体展示技术将抗体基因插入噬菌体基因组，使噬菌体表面展示抗体蛋白，通过筛选获得特异性单克隆抗体。转录组学分析对特定细胞群体的转录组资料进行分析，筛选出高活性抗体基因，随后利用基因工程技术实现这些基因的克隆与生产。

单细胞克隆技术杂交瘤技术通过结合B细胞与骨髓瘤细胞，构建出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞系。单细胞分离技术通过显微操作或流式细胞仪等手段，成功提取免疫动物脾脏中的单个B细胞。

抗体库技术单克隆抗体的定义单克隆抗体源自单一B细胞克隆，展现极高的特异性。单克隆抗体的特性单克隆抗体展现出卓越的均一性与专属性，能准确辨识并锁定特定抗原。

03单克隆抗体的应用领域

医学诊断免疫小鼠制备对特定抗原进行免疫处理的小鼠，能够诱导出具有特异性的B细胞，这些B细胞是后续制备杂交瘤细胞的关键基础。融合细胞筛选融合免疫小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞，随后在HAT选择培养基中进行筛选，以得到杂交瘤细胞。单克隆抗体筛选利用ELISA等技术筛选出能产生目标抗体的杂交瘤细胞株，进行克隆化培养以获得单克隆抗体。

药物治疗细胞融合利用细胞融合法，将特定B细胞与骨髓瘤细胞结合，生成能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。筛选与克隆通过有限稀释法或软琼脂克隆技术挑选出能够持续产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，随后对这些细胞进行克隆扩增培养。

研究工具单克隆抗体的定义单克隆抗体源自单一B细胞克隆，展现出极高的针对性。单克隆抗体的特性单克隆抗体在特异性与一致性方面表现出卓越性能，能精确地识别并锁定特定抗原。

04单克隆抗体技术难点

稳定性问题免疫小鼠制备通过给小鼠注射特定抗原，激发其免疫系统产生特异性抗体。细胞融合过程融合免疫小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞，产生杂交瘤细胞。筛选和克隆化筛选出能生产目标单克隆抗体的杂交瘤细胞，运用HAT培养基对其实施克隆培养。

亲和力成熟01抗体基因克隆通过PCR技术扩增抗体基因片段，然后将其克隆到表达载体中。02细胞转染将含有抗体基因的表达载体转染到宿主细胞中，如CHO细胞，以表达单克隆抗体。03筛选高表达细胞株采用流式细胞仪等先进技术，挑选出表达目标抗体量高的稳定细胞系。04优化表达条件通过优化培养基组成与培养条件，提升细胞增殖及抗体产出的效率。

人源化改造杂交瘤技术利用B细胞与骨髓瘤细胞结合，打造出能够分泌特定抗体的杂交细胞，以实现单克隆抗体的制造。细胞筛选与克隆化通过有限稀释法或单细胞分离技术，从杂交瘤细胞中挑选出能够持续产生特定抗体的单一细胞克隆。

05单克隆抗体的未来趋势

技术创新方向单克隆抗体的定义单克隆抗体源自单一B细胞克隆，具备极高的特异性。单克隆抗体的特性单克隆抗体以其均一性及特异性见长，能精确识别并与特定抗原牢固结合。

临床应用前景发现杂交瘤技术1975年，K?hler和Milstein发明杂交瘤技术，为单克隆抗体的制备奠定了基础。临床应用的起步在20世纪80年代，第一例针对癌症的单克隆抗体药物问世，从而拉开了单克隆抗体在医疗治疗领域应用的序幕。技术的优化与创新随着基因工程技术的发展，单克隆抗体的制备技术不断优化，提高了产量和纯度。单抗药物的多样化步入21世纪，单克隆抗体药物门类不断丰富，其应用领域也从癌症治疗延伸至