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doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2025.08.025
2022—2023年我国鸡传染性法氏囊病的流行情况分析
张丹丹,谢妍,范玉华,陈峰
(乾元浩生物股份有限公司检测中心北京100070)
摘要:为全面了解我国近两年市场中鸡传染性法氏囊的变化情况,通过对法氏囊病毒样本进行特异性VP2基因扩
增测序,以此来确定当前法氏囊病毒的流行情况。本研究应用RT-PCR方法对来自河南等省份的35份临床疑似病例样本
进行检测,确定有19份样本为阳性。用测序引物对基因的高变区进行测序,获得相应的核酸序列,将所获得序列与参考
毒株进行比较,绘制成遗传进化树。研究结果表明我国现阶段鸡传染性法氏囊病毒流行情况主要为变异毒株和强毒株。
关键词:鸡传染性法氏囊病;流行情况;分析
传染性法氏囊病在美国特拉华州甘保罗镇首先暴2.2病毒液接胚扩繁
发,最初被称为甘保罗病,是由传染性法氏囊病毒引取处理好的组织上清液接种于10日龄SPF鸡胚的
[1]绒毛尿囊膜,每胚接种0.3μL,接种后24h照检一
起的一种急性、高度接触性的传染性疾病,是目前
影响养禽业发展最严重的疾病之一。主要侵害雏鸡法次,之后每12小时照检一次直至照检为96h,期间随
氏囊等免疫器官中未成熟的B淋巴细胞或B淋巴细胞时取出死胚在4℃条件下保存待收。培养结束后,
前体细胞,可造成鸡的免疫抑制,增强鸡对其他微生收取所有鸡胚的绒毛尿囊膜及组织,并进行捣碎研
物的易感性,从而使其他病毒性或细菌性疾病并发磨,吸取研磨上清待检[6]。
或继发感染。同时也会导致疫苗免疫接种失败,给养2.3核酸检测
殖户造成巨大的经济损失。该病毒是一种无囊膜双第一,核酸提取。取处理好的组织上清液200μL
[2]
链RNA病毒,直径约60nm,属于双RAN病毒科禽存于EP管,按照1:10的比例配制蛋白酶,每个样本
[3]
双RNA病毒属。VP2是该病毒外表面的主要结构蛋配制220μL,将配好的蛋白酶加入样品管后振荡
[4]
白,也是病毒的主要宿主保护性抗原,可诱导其产混匀,将混好的样本放入56℃条件下的水浴锅处理
生保护性中和抗体,并具有血清型特异性,与毒力变15min,处理结束后取出样品管加入250μL无水乙
[5]
异、细胞凋亡有关。因此该基因被认为是研究病毒醇,振荡混匀后静止5min,将处理好的样品液全部倒
毒力和变异的主要基因。为了更好地了解并掌握现阶入离心柱内,进行12000rpm离心1min,弃掉滤出液
段IBDV流行情况,实验室收集来自河南等省份疑似后继续用洗液清洗两遍离心柱,最后进行12000rpm
鸡传染性法氏囊发病样本进行检测。空离离心柱,弃掉滤出液后更换EP管,用无酶水洗
脱离心柱核酸,从而获得样本总核酸样。
1材料第二,反转录扩增。将提取后的核酸加入到配
试验所用病料为2022—2023年采自市场疑似发病制的反转录酶内进行反转录,最
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