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ICS65.020.20
CCSB05
21
辽宁省地方标准
DB21/T4355—2025
花生抗白绢病鉴定技术规程
RuleforevaluationofresistancetopeanutstemrotcausedbySclerotium
rolfsii
2025-12-16发布2026-01-16实施
辽宁省市场监督管理局发布
DB21/T4355—2025
花生抗白绢病鉴定技术规程
1范围
本文件规定了花生抗白绢病鉴定的准备、接种、调查、抗病性评价和鉴定结果汇总等技术内容。
本文件适用于花生白绢病抗性的鉴定及评价。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB4407.2经济作物种子第2部分:油料类
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4准备
4.1培养基
4.1.1PDA培养基
称取200g马铃薯,洗净去皮切碎,加入1000mL水,煮沸20min~30min,纱布过滤,补水至1000
mL,加入15g琼脂和20g葡萄糖,搅拌均匀后分装至250mL三角瓶,121℃高压灭菌20min。
4.1.2燕麦片培养基
称取20g燕麦片于500mL三角瓶内,加入10mL水搅拌至燕麦片呈湿润状态,121℃高压灭菌20
min。
4.2接种物
4.2.1病原物分离
从具有白绢病典型症状的花生植株上收集茎秆基部的菌核,将收集到的菌核用75%乙醇处理30s,
再用30%次氯酸钠表面消毒2min,将消毒后的菌核用无菌水冲洗后于无菌环境中自然风干,将风干后
的菌核置于PDA平板培养基表面,于25℃培养箱内培养至菌核萌发,产生菌丝。花生白绢病症状见附
录B。
4.2.2病原物鉴定
观察菌丝和菌核形态,使用rDNA-LSU基因片段引物进行PCR扩增测序,鉴定为齐整小核菌
1
DB21/T4355—2025
(SclerotiumrolfsiiSacc.),经致病性测定后确定为供接种菌株。花生白绢病菌丝和菌核形态见附录A。
4.2.3病原物保存
在4℃条件下保存菌株,或用20%的甘油溶液于-40℃条件下长期保存,备用。
4.2.4接种物繁殖
菌株接种于PDA培养基上,25℃下培养至长出菌丝。从菌落边缘取菌饼转移至燕麦片培养基上,
置于25℃培养箱中培养至菌丝长满所有燕麦片,备用于接种。
4.3鉴定植株培养
4.3.1室内
选用长10cm×宽10cm×高8cm的花盆播种籽粒饱满的花生种子4粒,保苗3株。每个品种播种
3盆,置于人工气候箱内培养,培养条件为:温度28℃/23℃(昼/夜)、光周期16h/8h(昼/夜)、光
22
照强度400µmol/(m·s)~600µmol/(m·s)、相对湿度60%~70%,定期浇水。种子质量应符合GB4407.2
的规定。
4.3.2田间
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